Bacillus subtilis Sporlarının Üretimi ve Aerosol Bazlı Birikimi

Oldukça dirençli spor oluşturan bir bakteri olan Bacillus subtilis kültürü ile başlayın.

Kültürü besin açısından sınırlı bir ortama aşılayın ve sporülasyonu indüklemek için havalandırma ile inkübe edin.

Sporlanan hücreler, koruyucu katmanlara sahip hareketsiz sporlar üretir.

Kültürü bir tüpe aktarın ve sporları peletlemek için santrifüjleyin. Artık hücreleri ve kalıntıları içeren süpernatanı çıkarın.

Peleti steril damıtılmış suyla yıkayın, santrifüjlemeyi tekrarlayın ve sporları steril suda yeniden süspanse edin.

Faz kontrast mikroskobu kullanarak, parlak sporları tanımlayarak ve kirletici maddelerin bulunmadığını doğrulayarak sporun saflığını doğrulayın.

Sporların seri seyreltmelerini gerçekleştirin, besin agarı üzerine koyun ve canlı sporların koloniler halinde çimlenmesine izin vermek için inkübe edin. Spor konsantrasyonunu belirlemek için kolonileri sayın.

Bu konsantrasyona göre spor miktarını ayarlayın ve seyreltilmiş numuneyi bir aerosol nozülüne yükleyin. İnce, düzgün bir tek spor tabakası oluşturmak için süspansiyonun hızla kuruduğu steril bir cam yüzeye püskürtün.

Spor üretimini gerçekleştirmek için, uygun antibiyotiklerle desteklenmiş ilgili B.subtilis suşunun 5 mililitrelik gece