JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:24 dk. • October 30th, 2025
Vahşi tipte bulunan spesifik bir metale duyarlı genden yoksun olan vahşi tip bakterileri ve mutant bakterileri ele alalım.
Bakteriler, iç metal rezervlerini tüketmek için metali tükenmiş ortamlarda büyütülür.
Bu metal tükenmiş ortamda, vahşi tip bakterilerdeki metale duyarlı gen aktive olur ve mutant bakterilerde bulunmayan bir yüzey reseptörünü eksprese eder.
Düzgün hücre yoğunluğunu sağlamak için kültürleri seyreltin.
Metal-protein kompleksi içeren çok kuyulu bir plaka alın.
Seyreltilmiş kültürleri kuyucuklara ekleyin.
Plakayı, optimum bakteri üremesini teşvik etmek için çalkalayarak kontrollü bir sıcaklıkta tutulan bir plaka okuyucu içinde inkübe edin.
Zaman içinde bakteri üremesini izlemek için absorbansı düzenli aralıklarla ölçün.
Yabani tip bakterilerde metal reseptörü, metal iyonunun kompleksten çıkarılmasını sağlayarak büyümesini destekler.
Mutant bakteriler, metal reseptörleri olmadan kompleksten metal iyonunu çıkaramadıkları için sınırlı büyüme gösterirler.
Boş kontroller için üç kuyucuğun her birine 10 mikrolitre 10X ön karışım ve 90 mikrolitre CDM ekleyin.
Yan kol şişesindeki kültürler iki katına çıktıktan sonra, mikroplakadaki kullanılmayan bir kuyuya her kültürden 100 mikrolitre
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin