JoVE Encyclopedia of Experiments
Mikrobiyoloji
0 görüntüleme • 2:14 dk • October 30th, 2025
Patojenik bir bakteri olan Streptococcus mitis'in büyümesini destekleyen, besin açısından zengin bir ortam olan steril bir Todd-Hewitt Maya Ekstraktı veya THY agar plakasıyla başlayın.
Steril bir halka kullanarak plakayı bakteri suşu ile çizin.
Aşılanmış plakayı bir mum kavanozuna yerleştirin, bir mum yakın, kavanozu hava geçirmez şekilde kapatın ve inkübe edin.
Yanan mum oksijen tüketir ve karbondioksit seviyelerini artırarak konakçı benzeri koşulları taklit eden mikroaerofilik bir ortam yaratır.
Ortamdaki besinler ve kavanozun mikroaerofilik ortamı, bakteri çoğalmasını arttırır ve bir virülans fenotipinin gelişimini destekler.
İnkübasyondan sonra kavanoz kapağını çıkarın ve plakayı alın.
Steril bir halka kullanarak, izole edilmiş tek bir koloni seçin ve THY suyu içeren steril konik bir tüpe aktarın.
Virülans fenotipini korurken bakteri üremesini desteklemek için kültürü statik koşullar altında inkübe edin.
Bu kültür, konakçı-patojen etkileşimlerini araştırmak için patojenik bir model olarak kullanılabilir.
Mitis Group Streptococci'nin hazırlanmasından önce, THY agar plakalarını bir inkübatörde 37 santigrat dereceye ısıtın.
Bundan sonra, plakalar üzerinde istenen Streptococci suşlarını çizmek için steril bir halka kullanın.
Ardından, plakaları bir mum kavanozuna koyun ve mikroaerofilik bir ortam sağlamak için kavanozu gece boyunca 37 santigrat derecede yaklaşık 18 saat inkübe edin.
Ertesi gün, plakaları mum kavanozundan çıkarın ve izole edilmiş kolonileri seçmek için steril bir halka kullanın.
2 mililitre THY suyu içeren 15 mililitre steril konik tüpü aşılayın.
Kapakları sıkıca kapatın ve tüpleri statik koşullar altında 37 santigrat derecede inkübe edin.