JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:17 dk. • October 30th, 2025
Trakeası açıkta olan ötenazi uygulanmış bir fareyle başlayın. Farenin akciğerleri, patojenik bir bakteri olan tiplendirilemeyen Haemophilus influenzae ile önceden enfekte olmuştu.
Trakeaya bir kateter yerleştirin ve yıkama tamponu ile dolu bir şırıngaya takın.
Kan pıhtısı oluşumunu önlemek için bir antikoagülan ve hücre bütünlüğünü korumak için bir şeker içeren yıkama tamponunu uygulayın.
Kırmızı kan hücreleri, bağışıklık hücreleri ve kalıntı patojenler içeren bronkoalveoler lavaj sıvısını geri kazanmak için nazikçe aspire edin.
Prosedürü tekrarlayın ve geri kazanılan lavaj sıvısını tek bir süspansiyonda toplayın.
Havuzlanmış süspansiyondan bir alikot alın ve hücreleri ayırmak için santrifüjleyin. Süpernatanı atın.
Kırmızı kan hücrelerini seçici olarak parçalamak için hücreleri bir lizis tamponunda yeniden süspanse edin.
Kalan hücreleri ayırmak ve süpernatant içeren kalıntıları atmak için santrifüjleyin.
Kalan hücreleri bir arabellekte yeniden askıya alın.
Bağışıklık hücreleri ve kalıntı bakteriler içeren nihai süspansiyon, aşağı akış analizi için hazırdır.
Trakeaya erişmek için akciğerin ventral kısmını açığa çıkarın. Trakeayı 20 gauge kateterle entübe edin.
Kateteri kullanarak 0,8 mililitre
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin