Hızla Büyüyen Bakteri Vibrio natriegens'in Kültürlenmesi

Hızlı büyüyen bir bakteri olan Vibrio natriegens kültürünü içeren bir tüp alın.

Bakterileri peletlemek için kültürü santrifüjleyin. Artık ortam içeren süpernatanı atın.

Bakteri peletini taze ortamda yeniden süspanse edin ve bakteri kültürü hazırlama için aynı ortamı içeren konik bir şişeye aktarın.

Kültürü havalandırılmış koşullar altında çalkalayarak inkübe edin.

Kısa üretim süresi nedeniyle, Vibrio natriegens besinleri kullanır ve konsantre bir bakteri popülasyonu oluşturmak için hızla bölünür.

Bir spektrofotometre kullanarak bakteri konsantrasyonunu belirlemek için optik yoğunluğu (OD) düzenli olarak izleyin.

OD yaklaşık bire ulaşana kadar kültürü büyütün, bu da yüksek metabolik aktiviteye sahip üstel bir büyüme fazını gösterir.

Kültürü santrifüj tüplerine aktarın.

Hücresel bütünlüğü korurken bakterileri ayırmak için düşük sıcaklıkta santrifüjleyin.

Tüpü buzun üzerine yerleştirin ve hücresel kalıntı içeren süpernatanı çıkarın.

Aşağı akış analizi için bakteri peletini ultra düşük sıcaklıkta saklayın.

Başlamak için, gece boyunca Vibrio natriegens kültürünün bir mililitresini, bir dakika boyunca 10.600 kez g'da bir tezgah üstü santrifüjde santrifüjleyerek yıkayın.

Peleti bozmadan süpernatanı a