Oksijensiz Koşullarda Anaerobik Çamur Kültürü Hazırlama

Damıtılmış su içeren bir şişe ile başlayın.

Çözünmüş oksijeni uzaklaştırmak için suyu kaynatın ve anaerobik büyümeyi engelleyebilecek artık oksijeni en aza indirin.

Oksijenin yeniden emilimini önlemek için sürekli nitrojenle yıkarken suyu soğutun.

Şişeyi bir tartım terazisine yerleştirin ve sabit miktarda anaerobik çürütücü çamuru ekleyin.

Çamur, çeşitli anaerobik mikroplar ve artık organik maddeler içerir.

Azot ekleyin ve anaerobik koşulları korumak için şişeyi hemen kauçuk bir septumla kapatın.

Anaerobik bakterileri eşit şekilde dağıtmak ve çamurdaki organik madde ile teması iyileştirerek metabolizmayı uyarmak için çalkalayarak inkübe edin.

Oksijensiz ortam, oksidatif stresin neden olduğu metabolik hasarı önleyerek zorunlu anaerobların çoğalmasına izin verir.

İnkübasyon sonrası, daha büyük çamur parçacıklarının çökmesine izin verin.

Ardından, bir şırınga kullanarak anaerobik inokulumu geri çekin.

Anaerobik bakteri sağkalımını desteklemek için aşıyı oksijensiz büyüme ortamı içeren bir serum şişesine aktarın.

Anaerobik çürütücüden aşı hazırlamak için bir şişeye 400 mililitre damıtılmış su ekleyin ve kaynatın.

Kafa boşluğunu kalıcı olarak nitrojenle yıkarken yaklaşık 30 santigrat dereceye kadar