Manyetitle gömülü bakteriyel nanoselüloz pelliküllerinin üretimi

Bakteriyel nanoselüloz pellicle alın, jelatinimsi selüloz lifleri tabakası.

Üç boyunlu bir şişeye koyun, içinde demir tuzları çözeltisi bulunuyor.

Isıtma sırasında hacim kaybını önlemek için bir kondenser takın ve suyu içinden geçirin. Sonra, demir oksidasyonunu önlemek için matayı bir girişten azot gazıyla temizleyin.

Matayı silikon yağ banyosunda ısıtıp karıştırarak demir tuzlarının pellikle difuzyonunu teşvik edin.

Yavaş yavaş bir alkali ekleyerek pH yükselir, böylece demir tuzları pellicül matriks içinde manyetit nanopartikülleri oluşturur.

Sıcaklığı düşürün ve nanopartikül dağılımı eşit şekilde sağlamak için karıştırmaya devam edin.

Karışımı soğutun, sonra temiz bir kaba aktarın.

Bir mıknatıs kullanarak pellicle korun ve inkorporasyon dışı malzemeleri dekant edin.

Pellicle'i defalarca oksijensizleştirilmiş suyla yıkayarak pH nötr hale gelip süpernatan berrak görünüyor.

Pellicle taşın ve UV maruziyetiyle sterilize edilsin, ardından daha fazla inceleme için steril oksijensiz suya batırın.

1000 mililitre yüksek saflıkta suyu azot gazıyla kabararak sudaki çözünmüş oksijeni çıkarıp yerine azotla değiştirin.

Üç boyunlu yuvarlak tabanlı bir şişe kullanarak Demir (III) klorür heksahidrat ve Demir (II) klorür tetrahidrattan oluşan 2'ye 1 mol oranında bir çözelti hazırlayın; bu çözelti oksijensizleştirilmiş yüksek saflıkta suya seyreltilmiştir. Azot gazı beslemesini, septum stopper'da deliklenmiş ve damarın boynuna sabitlenmiş bir iğneye bağlayarak, sürekli azot gazı girişi ve çıkışı sağlamak için damarın 2 boynu kullanın. Reaktanların bulunduğu kaba bir BNC pellicle yerleştirin.

Numunenin tamamen sıvının içinde olduğundan emin olun. Sonra, tüm cam eklemleri vakum yağıyla doldurun. Kabın kalan boynunu, su dökmeyen kalsiyum sülfatla doldurulmuş bir kurutma borusuyla doldurulmuş bir kondansatör tüpüne bağlayın.

Suyu kondansatör borusundan geçirin. Sonra, çözeltiyi silikon yağ banyosunda 80 derece Celsius'a kadar ısıtın, karıştıran bir sıcaklık ile kullanın ve bu sıcaklığı korudun. Reaktanları 350 RPM'de 5 dakika boyunca küçük bir manyetik karıştırma çubuğu kullanın.

BNC'nin demir çözeltisiyle uygun şekilde emdirildiğinden ve reaktantların tamamen çözündüğünden emin olun. Karıştırma hızını 700 RPM'ye çıkar. Beş dakikalık bir zaman aralığında, septum stopper'da delilmiş pipetleme iğnesi ile 10 mililitrelik demir çözeltisine beş mililitre amonyum hidroksit ekleyin. Amonyum hidroksit eklendikten sonra, çözeltinin rengi sarı-turuncudan siyah'a değişir.

Çözeltiyi 80 derece Celsius'ta beş dakika daha karıştırmaya devam edin. Numunenin bütünlüğünü korumak için yüksek hızlı karıştırmalardan kaçının. Karışım sıcak plakanın alt kısmını kullanarak çözeltinin sıcaklığını 30 derece Celsius'a düşürün ve beş dakika daha karıştırmaya devam edin.

Sonra sıcak plakayı kapatın. Bu noktada, demir oksit nanopartikülleri BNC ağına entegre edilmiştir. Sonra, karışımı oda sıcaklığına soğutup manyetik nanopartikülleri (MNP) ayırmak için bir kap şişesine aktarın ve güçlü kalıcı bir mıknatısla BNC ile ayrılın.

Bunu yapmak için, mıknatısı kaba yakın tutarak MNP'leri ve BNC'yi yerinde tutarak süpernatantı dekant edin. MNP'leri ve BNC'yi 100 mililitre suya yeniden askıya alın. BNC'ye güçlü şekilde dahil edilmeyen tüm MNP'leri çıkarmak için çözeltiyi hafifçe sallayın.

Sonra, MNP'leri ve BNC'yi mıknatıs kullanarak yerinde tutarak süpernatantı tekrar dekant edin. MNP'leri ve BNC'yi suyla birkaç kez yıkayarak üst yüzey nötr pH'a ulaşana kadar, bu ölçü kolorimetrik şerit kullanılarak ölçülür. Manyetik fonksiyonel BNC'yi (MBNC) cımbız kullanarak MNP'lerden ayırın ve MBNC'leri su berrak dalana kadar birkaç kez suyla durulayın.

MBNC'yi gece boyunca UV'ye maruz bırakarak sterilize edin. MBNC'yi 20 dakika boyunca 120 derece Celsius'ta otoklavlanmış 20 mililitre oksijensizleştirilmiş yüksek saflıklı suda sakla. Aseptik olarak, örneği yüzde bir polietilen glikole (PEG) batırın ve oda sıcaklığında iki saat karıştırın. PEG ile kaplama, BNC'de depolanan demir oksit nanopartiküllerinin biyouyumluluk ve kararlılığını artırır; çünkü bu nanopartiküller MBNC 3D ağı üzerinden dağıtılmıştır.