Mikrop-Solucan Etkileşimlerini İncelemek İçin Yüksek Verimli Floresan Tahlil
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:45 dk. • November 28th, 2025
C . elegans solucanları içeren bir tüple başlayın.
Solucanları, kontrol bakterisi veya test bakterisi içeren besin açısından zengin agaroz ortamı içeren çoklu kuyu tabakasına aktarın.
Kuluçka sırasında solucanlar bağırsak epitelini kolonileştiren bakterileri tüketir ve besin kaynağı olarak hizmet veren amino asitler salgılar. Bu amino asitler amino asit türevlerine metabolize edilir ve lizozomla ilişkili bağırsak granüllerinde depolanır.
Sonra, taze tampon ekleyin ve solucanları siyah bir çoklu kuyu test plakasına aktarın.
Her kuyuya kimyasal bir stres indükörü ekleyin ve plakayı kapatın.
Plakayı floresan plaka okuyucuya yerleştirin ve floresansı kaydedin.
Solucanlarda, stres indüktörü oksidatif strese neden olur ve bu da bağırsak epitel hücrelerine zarar verir.
Bu, lizozomla ilişkili bağırsak granüllerinin yırtılmasına ve amino asit türevlerinin salgılanmasına neden olur; bu türevler ultraviyole ışığa maruz kaldığında mavi floresan hale gelir.
Kontrol ve test bakterilerine maruz kalan solucanların floresansını karşılaştırarak bakteri kolonizasyon verimliliğini ve bunların konakçının oksidatif stres yanıtı üzerindeki etkisini değerlendirin.
15 mililitrelik konik tüpte solucan konsantrasyonu
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin