JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:27 dk. • November 28th, 2025
Vibrio cholerae'nin ayrı kültürlerini ele alalım; patojenik bir bakteri olup, üç farklı biyotip içerir: klasik, vahşi tip El Tor ve El Tor varyantı; her biri genetik olarak farklı alt grupları temsil eder.
Her kültürü, Voges-Proskauer (VP) testini yapmak için özel bir ortamla doldurulmuş tüplere aşılayın.
Bakteri çoğalmasını kolaylaştırmak için sarsıntı ile kuluçka yapın.
Vahşi tip El Tor, ortamda glikozu fermente eder ve asetoin üretirken, klasik ve varyant biyotipler bunu yapmaz.
Sonra, her tüpe α-naftal ve potasyum hidroksit ekleyin, iyice karıştırın ve kuluçka yapın.
Potasyum hidroksit varlığında, atmosferik oksijen asetoinin diasetile oksidasyonunu katalize eder.
Diasetil, ortamda guanidin grupları içeren bileşiklerle reaksiyona girerek pembemsi-kırmızı renkli bir ürün oluşturur; bu ürün yoğunluğu α-naftal ile artırılır.
Renk gelişimi, vahşi tip El Tor biyotipine özgü pozitif VP reaksiyonunu gösterirken, klasik ve varyant biyotipler renk oluşumu göstermez.
4 mililitre Methyl Red Voges-Proskauer veya MR-VP çorbasını, önceden hazırlanmış gece kültüründen 10 mikrolitre pipetle steril kültür tüpünde 4 mililitre MR-VP çorbasına pipet edin, ardından 225 rpm'de bir shaker inkübatörde 12-16 s
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin