Floresan Biyomoleküllerin Bakteriyel Hücrelere Elektroporasyon Tabanlı Teslimatı
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 4:55 dk. • November 28th, 2025
Elektro yetkili bakteri hücrelerinin süspansiyonu içeren soğutma küpetiyle başlayın; bu hücreler membran geçirimliliğine karşı duyarlılığı artırır.
Süspansiyon ayrıca organik floroforlarla etiketlenmiş biyomoleküller içerir.
Geçici membran gözenekleri oluşturmak için yüksek voltajlı bir elektrik darbesi uygulayarak biyomoleküllerin sitoplazmaya girişini mümkün kılın.
Besin açısından zengin bir ortam ekleyin ve hücreleri bir tüpe aktarın. Zar onarımını teşvik etmek için kuluçka yapın.
Hücreleri santrifüjle edin, ardından içselleştirilmeyen biyomolekülleri içeren süpernatantı atabilirsiniz.
Hücreleri, yüzeye yapışan biyomolekülleri ayırmak için yüksek tuzlu bir tampon içinde bir deterjan içinde yeniden askıya alın.
Tekrar santrifüj yapın, süpernatantı atın ve hücreleri tampondaki yeniden süzüldürün.
Süspansiyonu bir filtreye ve santrifüja aktararak içselleştirilmemiş biyomolekülleri içeren akış akışını atabilir. Sonra hücreleri taze tampon ile durulayın ve tekrar süzültün.
Hücreleri agarose pedine monte edin ve bir örtü kullanabilirsiniz. Flüoresans etiketli bakteriler görselleştirmeye hazırdır.
Düşük iyon şiddetli tamponda hazırlanmış floresan biyomolekül stokuyla başlayarak, biyomoleküllerd
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin