JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:10 dk. • November 28th, 2025
Salmonella ve Salmonella olmayan türleri içeren bir kültürü selenit sistin ortamına aşılayın ve kuluçka için.
Selenit, selenyuma duyarlı bakterilerin metabolik süreçlerini bozarak büyümesini engeller.
Ancak, Salmonella dahil selenyuma toleranslı bakteriler seleniti metabolize edip büyütebilir.
Kültürü Xylose lizin deoksikolat veya XLD agar üzerine çizin ve kuluçka yapın.
Salmonella , XLD agarındaki sodyum tiosülfatı hidrojen sülfüne indirgemesi; bu sülfür temci içindeki ferrik iyonlarla reaksiyona girerek siyah demir sülfür oluşturur ve siyah merkezli koloniler oluşturur.
Buna karşılık, hidrojen sülfür üretmeyen Salmonella olmayan türler siyah merkezsiz koloniler oluşturur ve bu da Salmonella'dan görsel olarak farklılaşmaya olanak tanır.
Siyah merkezli bir koloni seçin ve daha fazla özgüllük için Salmonella kromojenik agara çizin.
Kromojenik agar, kromoforlarla bağlantılı Salmonella-spesifik enzim substratları içerir.
Salmonella enzimleri bu substratları parçalayarak kromoforları serbest bırakır ve pigmentli koloniler oluşturur.
Daha fazla analiz için bu kolonileri seçin.
Beş mililitre selenit kristal ortamına 100 mikrolitre ön zenginleştirme kültürü ekleyin. Sonra, kültürü 36 derece Celsius'ta 18 ila 24 saat kuluçka yapın. Sonra, kültürden bir halka topla ve bir tabağa yay.
Sonra, plakayı 36 derece Celsius'ta 18 ila 24 saat boyunca kuluçkaya geçirin. Kuluçkadan sonra, şüpheli kolonileri seçin ve bunları bir tabakaya aktarın. Plakayı 36 derece Celsius'ta 18 ila 24 saat boyunca kuluçka altına alın.