Name: Akış Sitometri Plazma Membran GLUT4 Translokasyon Kantitatif Ölçüm (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-11-07T17:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 39 s
Description: Öğrenin, akış sitometri ile memeli hücrelerinde insüline yanıt olarak GLUT4 translokasyonunu nasıl kantitatif ölçersiniz. Bu yöntem, glukoz metabolizması ve metabolik bozuklukların incelenmesinde araştırmacılara yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Bayan Clifford Yaşlı Beyaz Graham hibeleri tarafından desteklenen LTT NIH (AR052791, AR044387-arra &amp; NS063298), CB Araştırma Fonu ve Ulusal Sağlık Enstitüsü, (AR059838) donatılmış ve Baylor College of Medicine Sitometri NIH (NCRR S10RR024574, NIAID AI036211, NCI P30CA125123) finansmanı ile Çekirdek Ayırma ve Hücre. Içeriği sadece yazarların sorumluluğundadır ve mutlaka NIH resmi görüşlerini temsil etmemektedir.

1. Hücre Boyama <ol><li> Hücreleri hazırlayın. Hücreler hala aktif olarak büyürken (-% 80 izdiham 60) kullanılmalıdır. Serum inkübatörde 24-plaka ve yerine 0.5 ml serum orta, bir gecede ortalama 0,1 milyon plaka onları hücreler hücreleri açlıktan (37 ° C,% 5 CO 2) 30 dakika - 2 saat kurtarmak için trypsinization gelen. </li><li> Birincil ve ikincil antikorlar karıştırın. Mix (1 AlexaFluor 488 konjuge mcL ikincil tavuk anti-keçi IgG ile anti-GLUT4 birincil antikor 5 mcL) x kuyu sayısı. Karanlıkta, oda sıcaklığında 10 dakika inkübe edin. </li><li> Orta sulandırmaya insülin 2X çalışma stok hazırlayın. </li><li> Hücrelerin yapıştırılacağı ya da varsa kontrol edin. </li><li> Hücreleri içeren kuyu insülin 2X çalışma stoku 6 mcL antikor karışımı ve 0.5 mL yavaşça ekleyin. Orta herhangi bir türbülans kaçının. Inkübe (37 ° C,% 5 CO 2) 30 dakika süreyle karanlıkta. </li><li> Hücrelerin sallayarak olmadan, her bir kuyunun 0.5 mL PBS +% 1 PFA ekleyerek hücrelerin sabitleyin. Karanlıkta, oda sıcaklığında 20 dakika inkübe edin. </li><li> Hücreleri kuyulardan yapıştırılır varsa, yavaşça bir hücre kaldırıcı bunları kaldırın. Akış sitometresinin uyum ve pelet hücreler santrifüj tüpleri hücreleri (toplam 1 ml) aktarın. </li><li> 0,4 ml PBS ile iki kez 1 ml PBS ile tekrar süspansiyon pelet +% 1 PFA yıkayın. Bu noktada, hücrelerin folyoya sarılı ve buzdolabında saklanabilir (4-8 ° C) ya da hemen veri toplama için akış sitometresi götürüldü. </li></ol> 2. Veri Toplama <ol><li> Yan dağılım (SSC) karşı forward scatter (FCS) paneli canlı hücrelerin etrafındaki geniş bir kapı ayarlayın. FL1 parametre ayarlamak için olumsuz bir tüp (hücrelerin insülin veya bir izotipi kumanda ile "lekeli" hücre ile tedavi) kullanın. Zirve, panel tamamen alt tarafında kesilmiş değil emin olun. </li><li> Tüp başına en az 10.000 hücre veri almak. </li></ol> 3. Veri Analizi <ol><li> SSC vs FSC paneli (Şekil 1A) canlı hücrelerin etrafındaki bir kapı çizin. AlexaFluor 488 floresan yoğunluğu karşısında, canlı hücre kapısı içinde hücre (Şekil 1B) sayısı histogramlar çizilir. Farklılıkları görselleştirmek için farklı histogramlar kaplaması, ancak kantitatif için, her bir hücre popülasyonu için ortalama ve medyan floresan belirlemek ve karşılaştırmalar (Şekil 1C) için bu numaraları kullanabilirsiniz. </li><li> Şekil 1C ve 1D gösterildiği gibi insülin yokluğunda elde edilen değer, veri Normale. </li></ol> 4. Temsilcisi Sonuçlar , Sağlıklı bir birey (insülin direnci) izole matür olarak, insülin, plazma zarı (Şekil 1, sol) sitoplazma GLUT4 doza bağımlı bir translokasyon neden olur. Buna karşın, insülin, insülin direnci (Şekil 1, sağ) ile bir hastadan izole matür plazma membranı translokasyonu GLUT4 neden değildir. <img src="/files/ftp_upload/2429/2429fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1 boyama deney örneği. Matür insülin direnci olmayan bir donör (sol) ve insülin direnci (sağda) ile bir hastadan izole edildi. Canlı hücrelerin etrafındaki bir kapı ile SSC (yan dağılım) karşı FCS (forward scatter) arsa B, Hücreler kapılı GLUT4 harici bir epitop karşı antikor ile boyandı ve unstimulated (kırmızı) veya insülin 1 nM (mavi), 10 nM (turuncu), ya da 100 Nm (yeşil) ile uyarılan bıraktı. Rakam netliği için, biz sadece 100 nM insülin hücrelerin insülin direncine sahip olmadan ve verileri göstermektedir. C, B gösterilen histogramlar floresan yoğunlukları (MFI) (insülin) hücrelerin MFI normalize edildi unstimulated sol ortalama. D, histogramlar normalize MFI veri Arsalar B.

<ol><li>Zhao, F. Q., Keating, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+properties+and+genomics+of+glucose+transporters%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Genomics%22%5BJournal%5D)">Functional properties and genomics of glucose transporters.</a> Curr. Genomics. 8, 113-128 (2007).</li>
<li>Karnieli, E., Armoni, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+regulation+of+the+insulin-responsive+glucose+transporter+GLUT4+gene%3A+from+physiology+to+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">Transcriptional regulation of the insulin-responsive glucose transporter GLUT4 gene: from physiology to pathology.</a> Am. J. Endocrinol. Metab. 295, 38-45 (2008).</li>
<li>Graham, T. E., Kahn, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-specific+alterations+of+glucose+transport+and+molecular+mechanisms+of+intertissue+communication+in+obesity+and+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Horm.+Metab.+Res%22%5BJournal%5D)">Tissue-specific alterations of glucose transport and molecular mechanisms of intertissue communication in obesity and type 2 diabetes.</a> Horm. Metab. Res. 39, 717-721 (2007).</li>
<li>Alter, G., Malenfant, J. M., Altfeld, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD107a+as+a+functional+marker+for+the+identification+of+natural+killer+cell+activity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol.+Methods%22%5BJournal%5D)">CD107a as a functional marker for the identification of natural killer cell activity.</a> J. Immunol. Methods. 294, 15-22 (2004).</li>
<li>Vermes, I., Haanen, C., Steffens-Nakken, H., Reutellingsperger, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+assay+for+apoptosis.+Flow+cytometric+detection+of+phosphatidylserine+expression+on+early+apoptotic+cells+using+fluorescein+labeled+Annexin+V%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol.+Methods%22%5BJournal%5D)">A novel assay for apoptosis. Flow cytometric detection of phosphatidylserine expression on early apoptotic cells using fluorescein labeled Annexin V.</a> J. Immunol. Methods. 184, 39-51 (1995).</li>
<li>Lugli, E., Roederer, M., Cossarizza, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Data+analysis+in+flow+cytometry%3A+the+future+just+started%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">Data analysis in flow cytometry: the future just started.</a> Cytometry A. 77, 705-713 (2010).</li>
</ol>

Biz flow sitometri ile hücre plazma membranı sitoplazma GLUT4 translokasyon miktarının belirlenmesi için hızlı bir teknik ortaya koymuştur. GLUT4, sadece geçici olarak hücre plazma membranı ifade edilir ve endocytosed. Bağlı antikorlar endositoz sırasında bile, GLUT4 bağlı kaldığından, floresan sinyal insülin varlığında inkübasyon seçilen süresince plazma zarı maruz GLUT4 toplam tutarı verir. Bu teknik aynı zamanda, plazma zarı, hücre içi bölümünden diğer proteinlerin translokasyon eğitimi için uygulanan ilgi protein harici bir epitop yönelik iyi bir antikor mevcut olabilir. Örneğin, benzer bir analiz şimdi yaygın 4,5, plazma zarı CD107a translokasyon ölçerek sitotoksik T lenfositler ve doğal öldürücü lenfositleri degranülasyonunun oranını değerlendirmek için kullanılır. Plazma zarının iç tarafında hücre apoptozis veya nekroz sırasında dış tarafına fosfatidilserin translokasyon fluorofor etiketli Annexin V 6 kullanarak, flow sitometri ile tespit edilebilir. Flow sitometri, testin hızla yanı sıra, protein, karışık hücre popülasyonlarının plazma membranı translokasyonu çalışma izin avantajı sunuyor. Gerçekten de, bir hücre alt belirteçleri için bir çok lazer akış sitometresinin 7 veri toplama takip ilgi protein, boyama ve birleştirebilirsiniz. Protokol paragraf 1.2 &#39;de verilen antikorların miktarda bir başlangıç ​​noktası; ilgi hücreleri antikorlar titre minimum antikor konsantrasyonunu belirlemek için bir maksimum sinyal verir. Burada kullanılan birincil anti-insan GLUT4 antikor için iyi bir başlangıç ​​aralığı 1-10 mcL tüp başına (yani tüp başına 0,2-2 mg antikor), en fazla 1 milyon daha içeren hücreler her tüp olacaktır. Diğer primer antikorlar için, tedarikçinin talimatlarına bakın. Hücre otofloresans donörden donör ve deney deney yapmak değişecektir olarak veri normalleşmesi gerekmektedir.

<table><tbody><tr><td>Anti-human GLUT4 antikorları</td><td>Santa Cruz Biotechnology, Inc.</td><td>sc-1606</td><td>GLUT4'ün harici bir epitopuna karşı</td></tr><tr><td>AlexaFluor 488 ile konjuge edilmiş tavuk anti-keçi IgG</td><td>Invitrogen</td><td>A-21467</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinant insan insülini</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I2643</td><td></td></tr><tr><td>Hücre kaldırıcılar</td><td>VWR international</td><td>29942-118</td><td>Kuyucuklara uygun şekilde kesilmiş</td></tr><tr><td>FACS için 5 ml tüpler</td><td>VWR international</td><td>60819-138</td><td>Tüm BD cihazlarına uygun</td></tr></tbody></table>

akış sitometri plazma membran glut4 translokasyon kantitatif Ölçüm

Quantitative Measurement of GLUT4 Translocation to the Plasma Membrane by Flow Cytometry

Glikoz kan konsantrasyonunun sabit düzenleme gerektiren, vücut için temel enerji kaynağıdır. Pankreas tarafından insülin salınımını, insüline duyarlı dokularda, özellikle beyin, iskelet kası ve adipositler glikoz alımını tetikler. Tip-2 diyabet ve / veya obezite muzdarip hastalar genellikle insülin direnci geliştirme ve kendi glikoz dengesini kontrol edemiyoruz. Insülin direnci mekanizmaları getirdiği yeni anlayışlar, tip-2 şeker hastalığı için yeni tedavi stratejileri sağlayabilir. 1 vücut boyunca farklı dokular üzerinde dağıtılan onüç üyelerinin, glikoz nakliyecilerin GLUT aile oluşur . Glukoz transporter tipi 4 (GLUT4) önemli bir taşıyıcı gibi iskelet kası gibi hassas dokular, insülin aracılık glukoz alımı. Insülin reseptörüne bağlanması üzerine, GLUT4 glukoz alımı inducing plazma membranı, sitoplazma yerini değiştirmek içeren vezikül. Azaltılmış GLUT4 translokasyon, insülin direnci, tip-2 diyabet 2,3 nedenlerinden biridir. Sitoplazmaya plazma membran GLUT4 translokasyon fluorofor-konjuge GLUT4 özel antikorları kullanarak, immünsitokimya tarafından görüntülenmiştir. Burada, flow sitometri kullanılarak, seçilen bir süre boyunca hücrelerinin plazma membranı translokasyonu GLUT4 toplam miktarını ölçmek için bir teknik açıklar. Bu protokol hızlı (daha az insülin ile inkübasyon dahil olmak üzere 4 saat) ve tek bir deney 3000 hücreleri veya durum ortalama 1 milyon hücreleri gibi birkaç analiz sağlar. En kısa sürede plazma membranı translokasyonu sonra ekstrasellüler ortama maruz bağlamak taşıyıcı bir dış epitop yönelik anti-GLUT4 antikorlar dayanmaktadır.

Bu protokol, flow sitometri ile hücre plazma membranı, sitoplazma GLUT4 translokasyon ölçmek hızlı bir teknik anlatılmaktadır.

Akış Sitometri Plazma Membran GLUT4 Translokasyon Kantitatif Ölçüm

Glikoz, vücudun temel enerji kaynağıdır ve kan konsantrasyonunun sürekli olarak düzenlenmesini gerektirir. Pankreas tarafından insülin salgılanması, ...'yı tetikler.

Bu prosedürün genel amacı, insülin maruziyetine yanıt olarak memeli hücrelerin plazma membranına GLUT4 translokasyonunu tespit etmektir. Sadece hücre içi GLUT4 proteinine sahip olan serum açlığına bırakılmış miyoblastlar, öncelikle 24 kuyucuklu bir kültür kabına ekilir. GLUT4'ün eksternal bir epitopuna karşı geliştirilmiş, florokrom konjuge bir sekonder antikor ile önceden inkübe edilmiş antikor hücrelere eklenir ve ardından insülin uygulanır.Hücre yüzeyindeki insülin reseptörlerinin etkileşime girmesi, glut four'un plazma membran yüzeyine translokasyonu ile sonuçlanır. Ardından glut four, ortamdaki antikorlar tarafından tanınır. Bu noktada hücreler fikse edilebilir ve floresan boyamanın yoğunluğu akış sitometrisi ile ölçülebilir.Bu yöntem glukoz metabolizmasını ve ggl four translokasyonunu incelemek için kullanılabileceği gibi, membranda CD 1 0 7 A ekspresyonu aracılığıyla NK hücresi degranülasyonu gibi diğer sistemlere de uygulanabilir. Bu prosedür için, aktif olarak büyüyen veya %60 ila %80 konfluense ulaşmış ve gece boyu serumsuz bırakılmış hücrelerin kullanılması önemlidir. Hücreler tripsin ile toplandıktan sonra yıkanmalı ve standart büyüme ortamında mililitre başına 200.000 hücre olacak şekilde yeniden süspande edilmelidir; hücreler 24 kuyucuklu bir plakada kuyucuk başına 500 microliter hacimde 0,1 milyon olacak şekilde ekilmelidir. Ardından, hücrelerin tripsin etkisinden kurtulmalarını sağlamak için 37 °C'de bir saat boyunca inkübe edin.Bu sırada, primer anti glute four antikoru ile Alexa Fluor 4 8 8 konjuge sekonder chicken antigo IgG antikoru beş bir oranında karıştırın; her bir kuyu için 10 µL antikor karışımı kullanılacağını dikkate alarak gerekli olan final hacmi hesaplayın. Antikor karışımını oda sıcaklığında, karanlıkta 10 dakika boyunca inkübe edin. Antikor karışımı inkübe olurken, insülini büyüme ortamında istenen konsantrasyona seyrelterek iki katlık bir çalışma stoğu hazırlayın.Hücreler bir saat boyunca inkübe edildikten sonra, onları inkübatörden çıkarın. Hücre içeren her bir kuyucuğa nazikçe 10 µL antikor çözeltisi ekleyin. En az bir kuyucuğun boyanmamış olduğundan emin olun.Bu negatif örnek, daha sonra akış sitometresinin kurulumunda kullanılacaktır. Ardından, GLUT4'ün hücre yüzeyine translokasyonunu tetiklemek için her kuyucuğa 2x stok insülinden 500 µL ekleyin ve plakayı karanlıkta 37 °C'de 30 dakika inkübe edin. Hücreleri inkübatörden çıkardıktan sonra, her kuyucuğa 1 mL %1 PFA'lı PBS ekleyerek hücreleri fikse edin ve plakayı oda sıcaklığında karanlıkta 20 dakika inkübe edin; bir hücre kaldırıcı kullanarak fikse edilmiş hücreleri kuyucukların tabanından nazikçe ayırın ve her kuyucuktaki hücreleri ayrı bir faks tüpüne aktarın.Hücreleri çöktürmek için tüpleri santrifüjleyin, ardından vorteksleyerek bir mililitre PBS içinde yeniden süspande edin; hücreleri yıkamak için tekrar santrifüjleyin ve yıkama işlemini tekrarlayın. Bu adımı iki kez uygulayın. Yıkamalar arasındaki süpernatantı atın.Son olarak, yıkanmış hücreleri 400 µL PBS %1 PFA içerisinde yeniden süspande edin. Hücreler artık akış sitometresinde glute four yüzey ekspresyonu için analiz edilebilir. Örneklerinizle birlikte akış sitometresine ulaştığınızda, boyanmamış kontrolden veri toplamaya başlayın.İleri ve yan saçılım parametrelerini kullanarak geniş bir canlı hücre kapısı tanımlayın. Ardından, negatif pikin histogram sınırları içerisinde görünür olması için FL1 kanalının voltaj ayarını düzenleyin. Bu parametreler ayarlandıktan sonra, her bir deneysel örneği tüp başına en az 10.000 canlı olay kaydedecek şekilde çalıştırın.Bu histogram, 0, 1, 10 veya 100 nanomolar insüline maruz bırakılan miyoblastlarda yüzey GLUT4 boyamasının artışını göstermektedir. Buna karşılık, insülin direnci olan bireylerden alınan miyoblastlar, 100 nanomolar insüline yanıt olarak GLUT4 ekspresyonunu artıramamaktadır. Uyarılmış hücrelerin ortalama floresan yoğunlukları, uyarılmamış hücrelerinkine normalize edilirse, sağlıklı ve insülin dirençli miyoblastların MFI değerlerini doğrudan karşılaştırmak mümkündür.Bu prosedür kullanılarak, karma popülasyonlardaki farklı hücre alt kümelerini tanımlamak için hücreler ek yüzey veya hücre içi belirteçler açısından boyanabilir.

quantitative-measurement-glut4-translocation-to-plasma-membrane-flow

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu video, bir fare gözünde intravitreal doğumdan sonra floresan biyopartiküllerin mikroglial alımını ölçmek için akış sitometrisini göstermektedir. Akış sitometrisi, CD11b'yi eksprese eden canlı hücreleri tespit eder ve yeşil floresan sergileyen fagositik mikroglia hücrelerini, Ly6C eksprese eden monositler ve Ly6G eksprese eden nötrofiller dahil olmak üzere diğer miyeloid hücrelerden ayırır.

Akış Sitometrisi Kullanılarak İntravitreal Olarak Verilen Floresan Partiküllerin Mikroglial Alımının Ölçülmesi

Bu makale FRET kullanarak canlı hücreler glutamin dinamiklerini izlemek için nasıl gösterecektir. Genetik olarak kodlanmış sensörler hücrealtı çözünürlükte biyolojik moleküllerin gerçek zamanlı izlenmesini sağlar. Deneysel tasarım, deneysel ayarları teknik detayları ve post-deneysel analizler için düşünceler genetik olarak kodlanmış glutamin sensörler için ele alınacaktır.

Genetiği Kodlanmış Sensörleri kullanarak glutamin Akı Görüntüleme

Monositler, aktive edildiğinde glikolitik metabolizmaya dayanan insan doğuştan gelen bağışıklık sisteminin ayrılmaz bileşenleridir. Taze tam kandaki toplam monositler ve monosit alt popülasyonları tarafından glikoz taşıyıcı ekspresyonunu ve glikoz alımını ölçmek için bir akış sitometrisi protokolü tanımladık.

Basit Akım Sitometrisi Yöntemi Tüm Kan Monosit subpopulations için glikoz alımını ve Glikoz Transporter Anlatım Tedbir

Bu protokol, bir NLS-NES-GFP proteininin nükleer ithalatında gerçek zamanlı değişikliği niceleyerek motor nöron benzeri NSC-34 hücrelerindeki nükleositoplazmik taşınım oranını duyarlı bir şekilde ölçmek için bir yöntem açıklamaktadır.

Motor Nöron benzeri NSC-34 Hücrelerinde Gerçek Zamanlı Nükleositoplazmik Taşınımı Ölçüm Testi

Bu makalede, ayrılmış primer hipokampal kültürlerde glutamat reseptörü (GluR) kaçakçılığı çalışması için bir yöntem sunulur. Endojen veya aşırı ifade reseptörlerinin farmakolojik yaklaşımlar ile birlikte etiketlenmesi için antikor beslemeli bir yaklaşım kullanarak, bu yöntem, GluR yüzey ifadesini düzenleyen moleküler mekanizmaların belirlenmesi için izin verir veya geri dönüşüm süreçleri.

Disanated primer hipokampal kültürlerde glutamat reseptör kaçakçılığı çalışması için antikor beslenme yaklaşımı

TAR DNA bağlayıcı protein (TDP-43) proteinopatisi tarafından etkilenen Drosophila motor nöronlarında, FRET tabanlı, genetik olarak kodlanmış bir glikoz sensörü tarafından belirtildiği gibi glikoz alımı artar.

TDP-43 Proteinopatisinin Drosophila Modellerinde Glikoz Alımının Ölçülmesi

Bu çalışma, izole beyin mikrogliasında intranükleer akış sitometrisi kullanılarak küresel histon modifikasyonlarının ölçülmesi için bir protokolü açıklamaktadır. Çalışma ayrıca veri toplama için kullanılan mikroglia izolasyon protokolünü de içermektedir.

İzole Fare Beyni Mikrogliasında İntranükleer Akış Sitometrisi Kullanılarak Global Histon Post Translasyonel Modifikasyonların Miktar Tayini

Burada, akış sitometrisi kullanarak vGLUT1 pozitif sinapsların ve pHRodo Red etiketli ham sinaptozomların mikroglial yutulmasını ölçmek için iki protokol sunuyoruz.

Akış Sitometrisi Kullanılarak Sinaptik Materyalin Mikroglial Yutulmasının Miktar Tayini

Düzenlenmiş endositoz, hücre zarı proteinleri çoğunluğu yüzey ekspresyon düzeyleri yönetir. Burada, dopamin taşıyıcısı (DAT), polytopic membran proteini endositik hızını ölçmek için indirgenebilir, Membran geçirgenliği olmayan biyotinilasyon reaktifleri kullanmaktadır. Bu yöntem çoğu plazma membran proteinlerinin endositik oranını ölçmek için basit bir yaklaşımdır kolaylaştırır.

Tersinir biyotinilasyon Plazma Membran Protein endositik Oranları Ölçüm

Genetik mühendisliği ya da büyük örneklem büyüklüğü gerektirmeden, hassas bir doğal protein-protein etkileşimleri, sağlam, biyokimyasal değerlendirme sağlar IP-FCM yöntem sunulmuştur.

IP FCM: Sitometrisi ile Algılandı Immunoprecipitation

Öğrenin, akış sitometri ile memeli hücrelerinde insüline yanıt olarak GLUT4 translokasyonunu nasıl kantitatif ölçersiniz. Bu yöntem, glukoz metabolizması ve metabolik bozuklukların incelenmesinde araştırmacılara yardımcı olur.

Akış Sitometri Plazma Membran GLUT4 Translokasyon Kantitatif Ölçüm

Daha fazla video keşfet