Klebsiella pneumoniae tarafından bambu hidrolizatın mikroaerobik fermantasyonu

Bambu hidrolizatından hazırlanan ve mikrobiyal aktiviteyi desteklemek için temel tuzlarla desteklenen besin açısından zengin bir ortamla başlayın.

Bu hidrolizat, fermantasyon için gereken karbon kaynakları olan glikoz ve ksiloza içerir.

Ortamı, standart aerobik koşullarda yetiştirilen vahşi tip Klebsiella pneumoniae kültürü ile aşılayın.

Kültürü steril bir ortamda bir biyoreaktöre aktarın ve sınırlı oksijen veya mikroaerobik koşullar ile hafif asidik pH belirleyin.

Düşük oksijen seviyeleri bakteri metabolizmasını fermantasyona yönlendirir.

Hücreler önce piruvata parçalanarak endüstriyel uygulamalar için faydalı bir kimyasal olan 2,3-butandiol'e dönüştürülen glikozu kullanır.

Glikoz tükendikçe, hücreler beş karbonlu bir şeker olan ksilozu kullanır ve bunu pirufata dönüştürür.

Bu, aynı fermantasyon yoluyla ksilozdan 2,3-butandiol'ün daha yavaş üretilmesini sağlar.

Bu süreç, bambu kaynaklı şekerlerin oksijen sınırlı koşullarda faydalı bir fermantasyon ürününe mikrobiyal dönüşümünü vurgular.

Metin protokolüne göre fermantasyon ortamı hazırlandıktan sonra, K ekleyerek tohum kültürü hazırlanır. Pnömoniya hücreleri bir tabakaya ve gece boyunca kültüre alınır. Sonra kültürü 50 mililitre LB ortamı içeren 250 mililitrelik bir şişeye aktarın.

Kültürü gece boyunca 37 derece Celsius ve 200 RPM'de kuluçka altına alın. Vahşi tip, tomurcuk C mutantı ve tomurcuk A mutantı sırasıyla 2,3-butandiol, R-asetoin ve 2-ketoglukonik asit üretimi için kullanılır. Tohum kültüründen 50 mililitreyi biyoreaktöre aşılayın.

Kültürü 37 derece Celsius'ta tutun, pH ise sırasıyla 6.0 ve 7.0 olarak R-asetoin ve 2,3-butandiol olarak belirlenir. 2-ketoglukonik asit üretimi için, kültürü ilk dört saat pH 7.0'da tutun, ardından pH 5.0'a geçin. 2,3-butandiol üretimi için, kültürü mikroaerobik ortamda iki litre/dakika ve 250 RPM hızında hava takviyesi ile sürdürün.

R-asetoin üretimi için, kültürü aerobik ortamda 450 rpm'de dakikada dört litre hava takviyesi ile sürdürün. 2-ketoglukonik asit üretimi için, hava takviyesi ve çaltlama hızları ile yüksek aerobik koşulları sırasıyla dakikada dört litre ve 500 RPM'de korun.

Kültür pH, hava takviyesi oranı ve ajitasyon oranı hassas şekilde kontrol edilmelidir.