S. aureus'tan Metabolitlerin Analizi İçin Sıvı Kromatografi–Kütle Spektrometrisi Temelli Yaklaşım

0 görüntüleme2:23 dk • November 28th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Staphylococcus aureus'un silika boncukları içeren bir soğutma çözeltisinde askıya getirilmesiyle başlayın; metabolik durumunu korumak için düşük sıcaklıkta saklanır.

Bakterileri soğuk koşullarda homojenize ederek hücre içi içeriği serbest bırakarak metabolitlerin enzimatik bozulmasını en aza indirin.

Lizat santrifüj edilip metabolit açısından zengin süpernatantı elde edin.

Öze organik bir çözücü ekleyin ve çözünür metabolitlerden makromoleküller çökeltmek için vortekse bağlanın.

Santrifüjle çökeltiyi pellet eterek üst sıvıyı şişelere aktarın.

Şişeleri sıvı kromatografi-kütle spektrometrisi sistemine yükleyin.

Kromatografi kolonunun içinde, metabolitler kimyasal özelliklerine göre katı durağan fazlayla etkileşime girer.

Metabolitleri elütasyon etmek için bir tampon ekleyin. Sonra, metabolitleri kütle spektrometresinin elektrosprey iyonizasyon kaynağına yönlendirerek iyonlaştırın.

İyonlar daha sonra kütle-yük oranlarına göre ayrılır.

Ortaya çıkan veriler, metabolitleri tanımlamak için referans veritabanı ile karşılaştırılır.

Metabolit çıkarımı başlatmak için önce örnekleri ıslak buz üzerinde eritirin. Sonra hücreleri bir homojenizerde 6000 rpm'de dört adet 30 saniyelik patlama ile bozun, döngüler arasında kuru buzda iki dakikalık soğutma dönemi var.

Lizatları maksimum hızda önceden soğutulmuş bir mikrosantrifüj tüpünde 15 dakika boyunca temizleyin. Santrifüjlemenin ardından, süpernatantı temiz bir mikrosantrifüj tüpüne aktarın. Bir mikropipet kullanarak, metin protokolünde tanımlandığı gibi kalıntı peptid içeriğinin nicelendirilmesi için küçük bir parça mikrosantrifüj tüpüne aktarılır.

Kalan numuneyi eksi 80 derece Celsius'ta sakla. Metabolitlerin sıvı kromatografisi ve kütle spektrometrisi yoluyla analizi için metin protokolüne başvurun.

07:25

Sıvı KromatografiSi Kullanan Saccharomyces Cerevisiae'nin Nicel Metabolomikleri Tandem Kütle Spektrometresi ile Birleştiğinde

İlgili videolar

0 Görüntüler

14:42

Sıvı Kromatografisi, Lysate Tabanlı Hücre içermeyen Sistemlerde Metabolit Profilleme için Kırılma İndeksi veya Kütle Spektrometrik Algılaması ile Birleştirilmiştir

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:14

Sıvı Kromatografisi-Tandem Kütle Spektrometrisi Analizi için Siyanobakterilerden Protein Dışı Amino Asitlerin Ekstraksiyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:34

Ultra Performans Sıvı Kromatografisi-Kütle Spektrometresi (UPLC-MS) ile Serum Büyük Ölçekli Sigara hedefli metabolomik Profilleme

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:00

Ultra Performanslı Sıvı Kromatografi-Yüksek Çözünürlüklü Kütle Spektrometre (UPLC-HRMS) kullanarak Biyolojik Kaynaklar gelen hedefsiz Metabolomik

İlgili videolar

0 Görüntüler

14:18

Hassas, Büyük Ölçekli Kantitatif metabolomik için bir strateji

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:03

metabolit analizi için bir Tandem Sıvı Kromatografi-Kütle Spektrometresi tabanlı yaklaşım Stafilokok aureus

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:17

İzotop seyreltme HPLC-MS/MS kritik hastalıklar içinde antibiyotik ile tedavi edici ilaç izleme multiplex

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:06

Ters Faz Sıvı Kromatografi-Kütle Spektrometresi Ile Hücresiz Protein Sentezmetabolizmasının Mutlak Niceliği

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:10

Hedefsiz Sıvı Kromatografisi-Kütle Spektrometresi Tabanlı Metabolomik Buğday Tanesi Analizi

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 15 Ağustos 2026