JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:35 dk. • November 28th, 2025
Bir siyanobakteriyel suşun bir döngüsünü büyüme ortamına aşılayarak başlayın. Hücrelerin istenen yoğunluğa ulaşmasını sağlamak için kuluçka yapın.
Hücreleri santrifüjle yıkayın ve kalıntı metabolitler ile kalıntı içeren süpernatantı atın.
Pelleti küçük hacimli bir büyüme ortamında yeniden askıya alın ve konsantre bir süspansiyon oluşturulur.
Bu süspansiyonun bir aliquotunu gliserol ile karıştırın; bu kriyoprotektan membranı stabilize eder ve dondurma sırasında buz kristali oluşumunu önler.
Başka bir aliquot'a, hücrelere nüfuz eden ve buz nükleasyonunu engelleyen kriyoprotektan olan dimetil sülfoksit ekleyin.
Örnekler, metabolik aktivitenin durduğu ve hücrelerin uzun süre canlı kaldığı düşük sıcaklıklarda saklanır.
Canlandırmak için, stresi azaltmak ve kademeli iyileşmeyi desteklemek için az miktarda donmuş biyokütleyi bir agar plakasına kazıyarak antibiyotik ve çizgi çizerek kullanın.
Bu yöntem, gelecekteki çalışmalar için siyanobakteriyel suşların uzun vadeli kriyo-koruması ve canlandırılmasını sağlar.
Suşları uzun vadede depolamak için, 30 ila 50 mililitre BG11 ortamına hücre dolu bir halka aşılayarak suşun taze kültürünü kurun. Kültürü üç ila dört gün boyunca 0.4 ila0.7 ile 0.7 arasında
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin