Bakteriyel Maruziyetten Sonra C. elegans'ta Bağırsak Geçirgenliğinin Değerlendirilmesi

C'yi alalım. E içeren besin açısından zengin agar plakalarında yetiştirilen elegans solucanları. kontrol durumu için coli, patojen durumu için ise Pseudomonas aeruginosa.

Kuluçka sırasında, solucanlar bağırsak lümenini kolonileştiren bakterilerle beslenir.

Kontrol sisteminde, bağırsak epiteli sağlam kalırken, patojenlerden salınan toksinler epitel hasarına neden olur.

Solucanları bir tampon ile yıkayın ve floresan izleyiciler ile ısıya etkisiz bakterilerle takviye edilen tabaklara aktarın.

Kontrol sisteminde, yutulan floresan izleyiciler bağırsakta kalırken, patojenle enfekte olan solucanlarda hasar görmüş epitelden geçerek vücut boşluğuna girerler.

Solucanları tekrar yıkayın ve taze tabaklara koyun. Daha sonra bunları hücresel yapıyı korumak için bir fiksatif içeren çoklu kuyu test plakasına aktarın.

Fiksanti çıkarın. Sonra görüntüleme için bir montaj ortamı ekleyin.

Floresans görüntüleme sistemi kullanarak gözlem yapın.

P. vücut boşluğunda artan floresans. Aeruginosa'ya maruz kalma solucanları, patojenin indükleyen bağırsak geçirgenliğini gösterir.

Yaşla senkronize edilmiş L4 larvalarını S-tampon ile yıkayın ve yaklaşık 500 solucanı farklı bakteri ve kimyasalları içeren NGM plakalarına ak