JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:39 dk. • September 30th, 2026
Sükroz gradyanı içeren bir ultrasantrifüj tüpü ile başlayın.
Virüs içeren süpernatanı üzerine dikkatlice ekleyin.
Gradyanı korumak için kontrollü hızlanma ve yavaşlama ile santrifüj ederek, partiküllerin dönme sırasında kendi kaldırma yoğunluklarına uygun katmana yerleşmelerini sağlayın.
Daha hafif proteinler üst katmanda kalır. Bozulmamış viral partiküller, düşük ve yüksek yoğunluklu katmanlar arasında konsantre olurken, daha ağır hücresel kalıntılar dibe çöker.
Üst tabakaları atın ve virüs bakımından zenginleştirilmiş orta sakroz fraksiyonlarını yeni bir tüpe toplayın.
Tampon ekleyin ve örneği birkaç kez karıştırın.
Ardından, viral süspansiyonu yeni bir tüp içindeki düşük yoğunluklu sükroz yastığının üzerine dikkatlice katmanlayın.
Süspansiyonu santrifüjleyin. Daha ağır viral partiküller dibe çökerken, daha hafif kontaminantlar süpernatantta kalır.
Süpernatantı atın. Tüpü bir kağıt havlu üzerine ters çevirerek kalan sıvının süzülmesini sağlayın.
Viral pellet'i tampon çözeltide yeniden süspande edin.
Virüsle zenginleştirilmiş süspansiyon, sonraki çalışmalar için hazırdır.
Sakroz gradyanı ile katmanlar oluşturmak için konik ultrasantrifüj tüplerini farklı sakroz konsantrasyonları ile doldurun
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin