JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:51 dk. • August 31st, 2026
Saptama için kullanılan bir protein markeri olan HIV-1 p24 antijeni içeren lentiviral vektörleri alın.
p24'ü liz etmek ve serbest bırakmak için bir deterjan ekleyin, ardından örneği seri olarak dilüe edin.
Anti-p24 monoklonal antikorlarla kaplanmış ve spesifik olmayan bağlanmayı önlemek için bir bloklama ajanı içeren bir mikroplaka alın.
Numune dilüsyonlarını ve referans olarak p24 standartlarını ekleyin.
p24 proteininin spesifik bir epitop aracılığıyla antikorlarla etkileşime girmesine izin vermek için inkübe edin, ardından bağlanmamış bileşenleri uzaklaştırın.
p24 üzerindeki farklı epitoplara bağlanan anti-p24 poliklonal antikorlar ile inkübe edin. Bağlanmamış antikorları uzaklaştırın.
Poliklonal antikorlara bağlanan peroksidaz bağlantılı antikorları ekleyin. Bağlanmamış antikorları uzaklaştırın.
Renkli bir ürüne dönüşen bir peroksidaz substratı ekleyin.
Peroksidazı inaktive etmek ve ürünü stabilize etmek için bir asit ekleyin.
p24 konsantrasyonu ile orantılı olan renk yoğunluğuna karşılık gelen absorbansı ölçün.
Viral titeri belirlemek için standart grafiği oluşturun ve örnek konsantrasyonlarını tahmin edin.
Yüksek bağlanma kapasiteli 96 kuyucuklu bir plakayı, NIH AIDS aşı programının HIV-
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin