JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 4:56 dk. • September 30th, 2026
Test kuyucuğunda koronavirüse özgü antikorlar içeren, ısı ile inaktive edilmiş hasta serumunun bulunduğu çok kuyucuklu bir plaka alın. Kontrol olarak sağlıklı insan serumu ekleyin.
Koronavirüs spike proteinleri sergileyen ve yeşil floresan protein kodlayan RNA taşıyan psödovirüsleri serum örneklerine ekleyin ve inkübe edin.
Test kuyucuğunda antikorlar spike proteinlerine bağlanarak psödovirüsleri nötralize ederken, kontrol kuyucuğunda spesifik olmayan antikorlar spike proteinlerine bağlanmaz ve psödovirüsler serbest kalır.
Karışımı epitel hücre monokatmanlarına ekleyin. Viral adsorpsiyon için inkübe edin.
Viral difüzyonu kısıtlamak için her kuyucuğa yarı katı overlay medyumu ekleyin. İnkübe edin.
Kontrolde, bağlanmamış psödovirüsler hücre reseptörlerine bağlanır, hücrelere girer, RNA'yı salar ve GFP eksprese ederek floresan enfeksiyon odakları oluşturur.
Test kuyucuğunda, antikorla nötralize edilmiş psödovirüsler hücrelere giremez ve böylece enfeksiyon odaklarının oluşumu engellenir.
Bir floresan imajlama cihazı altında, floresan enfeksiyon odaklarını sayın.
Kontrol kuyucuğundaki çok sayıda odakla karşılaştırıldığında, test kuyucuğunda enfeksiyon odaklarının bulunmaması, psödovirüslerin ha
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin