JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:42 dk. • September 30th, 2026
İnsan epitel benzeri hücrelerle başlayın.
İlk kuyucuk transfekte edilmemiş hücreleri, ikinci kuyucuk ise microRNA mimic transfekte edilmiş hücreleri içerir.
Transfekte edilen hücrelerde, bir microRNA mimic zinciri, bir RNA-indüklemeli susturma kompleksi oluşturmak için bir protein kompleksi ile bağlanır.
Besiyerini uzaklaştırın ve viral süspansiyonu ekleyin.
Viral tutunmayı sağlamak için inkübe edin.
Besiyerini dökün ve taze besiyeri ekleyin, ardından inkübe edin.
Transfekte edilmemiş hücrelerde virüs, reseptör aracılı endositoza uğrar ve hücreye girer.
Viral genomu salar; bu genom replike olur ve çok sayıda viral partikül üretir.
Transfekte hücrelerde, RNA-indüklemeli susturma kompleksi viral genomu tanıyarak yıkımını tetikler ve virüs üretimini azaltır.
Yeni virüsler salınır. Virüs içeren ortamı aktarın.
Kalıntıları çöktürmek için santrifüjleyin ve virüs içeren süpernatantları toplayın.
Süpernatantı transfekte edilmemiş hücrelere ekleyin. Viral enfeksiyon için inkübe edin.
Transfekte edilmemiş hücre süpernatantı ile işlem gören kuyucuklar, microRNA mimic'i transfekte edilmiş hücre süpernatantı ile işlem gören kuyucuklara kıyasla daha yüksek hücre ölümü göstermektedir; bu durum, viral replika
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin