JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:44 dk. • September 30th, 2026
Antiviral aktiviteyi değerlendirmek için, test bileşiğinin seri dilüsyonlarını içeren çok kuyucuklu bir plaka ile başlayın.
Her bir kuyuya, lusiferaz eksprese eden rekombinant kızamık virüsü içeren bir insan embriyonik böbrek hücresi süspansiyonu ekleyin.
Hücrelerin her kuyucuğun tabanına yapışmasına izin vermek için inkübe edin.
Test bileşiğinin bulunmadığı kontrol kuyucuğunda, virüs hücre membranı ile kaynaşır ve genomunu sitoplazmaya salar.
Viral genom, raporlayıcı protein lusiferaz ile birlikte viral RNA ve proteinlerin üretimini yönlendirir.
Test kuyucuklarında, antiviral bileşik viral replikasyonu inhibe ederek lusiferaz üretimini azaltır.
Her bir kuyucuğa, lusiferaz ile etkileşime girerek lüminesans yayan lusiferaza özgü bir substrat ekleyin.
Her bir kuyucuktaki lüminesans yoğunluğunu ölçmek için bir plaka okuyucu kullanın.
Test kuyucuklarındaki lüminesansın kontrol kuyucuğuna kıyasla daha düşük olması, viral inhibasyonu gösterir.
Bileşik konsantrasyonu arttıkça lüminesansta görülen kademeli azalma, viral replikasyonun doz bağımlı inhibisyonunu gösterir.
Bileşik dilüsyon plakasından bir mikrolitre ile beyaz barkodlu doku kültürü plakasına ekleyin. Üçlü bir test plakası seti oluşturmak
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin