JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:39 dk. • September 30th, 2026
Rekombinant kızamık virüsü antigenom plazmidini ve temel viral proteinleri kodlayan yardımcı plazmidleri kapsülleyen bir lipozom süspansiyonu ile başlayın.
Antigenom plazmidi, enfekte hücrelerde immünostimülatuvar proteinlerin ve floresan bir raporlayıcının ekspres edilmesi için modifiye edilmiş kızamık genomu cDNA'sını içerir.
Kontaminasyonu önlemek için antibiyotik içeren bir virüs üretici hücre kültürü alın.
Lipozom süspansiyonunu kültüre ekleyin ve inkübe edin.
Lipozomlar, plazmidleri iletmek için hücre zarı ile kaynaşır.
Konak hücre mekanizması, antigenom cDNA'sını RNA'ya ve yardımcı plazmitleri mRNA'lara transkribe ederek protein ekspresyonunu ve viral replikasyon kompleksinin oluşumunu sağlar. Bu kompleks, viral protein ekspresyonuna olanak tanıyan genomik RNA üretir.
Genomik RNA, rekombinant viral partiküller üretmek için viral proteinlerle birleşir.
Enfekte hücreler ayrıca mikroskobik görüntüleme için floresan raporlayıcı proteini eksprese eder ve virüs tarafından kodlanan immünostimülatör proteini üretir.
Enfekte hücreler, kızamığın sitopatik etkisinin belirgin bir özelliği olan çok çekirdekli sinsitya yapılarını oluşturur.
Rekombinant virüs kurtarmasının başarılı olduğunu doğrula
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin