JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:01 dk. • September 30th, 2026
Hedef antijeni eksprese eden genetik olarak modifiye edilmiş tümör hücreleri içeren bir test kuyucuğu ve antijenden yoksun tümör hücreleri içeren bir kontrol kuyucuğu ile başlayın.
Viral bir transgen tarafından kodlanan, biri hedef antijen için diğeri ise T hücresine özgü bir reseptör için olmak üzere iki bağlanma bölgesine sahip bir bispesifik T-hücresi bağlayıcı (BTE) kullanın.
BTE ve T hücrelerini kuyucuklara ekleyin ve inkübe edin.
Test örneğinde, BTE tümör hücresi ile T hücresini birbirine bağlayarak T hücresini sitolitik granüller salması için aktive eder.
Bu işlem tümör hücresini lizleyerek hücre içi bir enzimin salınmasını sağlar.
Kontrolde, BTE yalnızca T hücresine bağlanarak tümör hücresi lizisini önler.
Santrifüjleyin ve süpernatanı toplayın.
Süstrat ekleyin ve inkübe edin.
Enzim, substratı kırmızı renkli bir ürüne katalizler.
Durdurma çözeltisi ekleyin ve renk yoğunluğunu ölçün.
Test örneğindeki daha yüksek yoğunluk, BTE'nin hedefe özgü immünomodülatör aktivitesini doğrular.
LDH salınımı yoluyla BTE kaynaklı hücre aracılı sitotoksisitenin değerlendirmesine başlamak için, önce virüsle enfekte hedef hücreler tarafından eksprese edilen salgılanmış transgen ürünlerini ve makalede açık
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin