JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 4:32 dk. • September 30th, 2026
Bir respiratuar sinsityal virüs (RSV) süspansiyonunun seri dilüsyonlarını hazırlayın.
Her dilüsyonu, RSV'ye duyarlı memeli hücreleri ekilmiş çok kuyucuklu bir plakanın ayrı kuyucuklarına inoküle edin.
Virüsün hücre yüzey reseptörlerine bağlanması, membran füzyonunu gerçekleştirmesi ve genomunu sitoplazmaya salması için inkübe edin.
Ardından, viral difüzyonu kısıtlamak için yarı katı bir örtü ortamı uygulayın ve inkübe edin.
Enfekte hücreler, hücreden hücreye füzyona aracılık eden ve sinsitya adı verilen çok çekirdekli yapıların oluşmasını sağlayan viral füzyon proteinini eksprese ederler.
Viral replikasyon ilerledikçe, bu sinsitya yapıları dejenere olur ve plaklar olarak bilinen berrak bölgeler oluşturur.
Üst tabakayı uzaklaştırmak için plakayı nazikçe sallayın ve kalıntıları temizlemek için hücreleri durulayın.
Plakları boyanmamış bırakacak şekilde, canlı hücreleri boyamak için bir boya uygulayın.
Boyayı uzaklaştırın, plakayı çamaşır suyu ile dekontamine edin ve suyla durulayın.
Plakanın havada kurumasına izin verin.
Viral titreyi belirlemek için belirgin plakların olduğu kuyucukları seçin ve bunları sayın.
Plak titrasyon deneyi gerçekleştirmek için öncelikle ticari 10X MEM'i steril su ile s
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin