JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:31 dk. • September 30th, 2026
Genetik olarak modifiye edilmiş bir virüsle enfekte edilmiş epitel hücreler içeren çok kuyucuklu bir plaka ile başlayın.
Virüs, lusiferaz enzimi kodlayan bir transgen taşımaktadır.
Beyaz duvarlı çok kuyucuklu bir plakada taze epitel hücre kültürleri alın.
Bilinmeyen konsantrasyonlarda virüs içeren süpernatantı beyaz duvarlı kuyucuklara aktarın.
Eş zamanlı olarak, standart olarak bilinen konsantrasyonlarda virüs ekleyin.
Viral partiküller ile konak hücre yüzey reseptörleri arasındaki yakın teması artırmak için plakayı santrifüjleyin ve inkübe edin.
Virüs konak hücreye girer ve negatif zincirli RNA genomunu aktarır.
Viral RNA polimeraz daha sonra genomu mRNA'ya transkribe eder.
Konak hücrenin hücresel mekanizması kullanılarak mRNA, lusiferaz dahil olmak üzere viral proteinlere translele edilir.
Konak hücre içinde biriken lüsiferaz miktarı, artan viral konsantrasyonla birlikte artar.
Numuneler, lusiferaz analizi kullanılarak viral konsantrasyonların daha ileri kestirimi için hazırdır.
VSV-Delta-51'in serumsuz DMEM içinde, Vero hücrelerine aktarıldıktan sonraki mililitredeki plak oluşturan birimlerin final konsantrasyonu şu şekilde olacak şekilde bir standart eğrisi hazırlayın. Vero hücreleri pla
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin