Konak İmmün Yanıtlarını Değerlendirmek Amacıyla Farelerde İntranazal Murine Herpesvirüs Enfeksiyonu

Respiratuvar uygulama için konumlandırılmış, sağlıklı ve anestezize edilmiş bir fare ile başlayın.

Enfeksiyonu başlatmak için murin herpesvirüsü intranazal olarak uygulayın.

Virüs hava yolları aracılığıyla ilerler ve akciğerlere ulaşır.

Akciğerlerde virüs, akciğer epitelyal hücrelerini enfekte eder ve nukleokapsidini serbest bırakır.

Viral genom çekirdeğe girer ve viral RNA'ya transkribe edilir.

Bir konak sitozolik sensörü viral RNA'yı tanır ve spesifik transkripsiyon faktörlerini aktive eden sinyal yolaklarını başlatır. Bu faktörler daha sonra, antiviral sitokin üretimine yol açan sitokin genlerinin ekspresyonunu teşvik eder.

Enfeksiyon sonrası, ötanize edilen fareyi disseke edin ve akciğer dokusunu toplayın.

Bir akciğer lobunu silika boncuklar içeren bir tüpe yerleştirin ve soğuk kültür ortamı ekleyin.

Hücreleri parçalamak ve antiviral sitokinler dahil olmak üzere hücre içi bileşenleri açığa çıkarmak için dokuyu homojenize edin.

Homojenatı buz üzerinde soğutun, ardından dokunun tamamen parçalandığından emin olmak için homojenizasyon işlemini tekrarlayın.

Hücre artıklarını çöktürmek için santrifüjleyin.

Herpesvirüs enfeksiyonuna karşı konakçı bağışıklık yanıtını değerlendirmek için antiviral