JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 4:05 dk. • September 30th, 2026
Bir biyogüvenlik kabini içerisinde, yüksek derecede bulaşıcı bir viral süspansiyonu TEM ızgaraları içeren bir kapsüle aspire edin.
Virüslerin ızgara boyunca eşit şekilde tutunmasına yardımcı olmak için yatay olarak inkübe edin.
Bağlanmamış virüsleri içeren süspansiyonu uzaklaştırın, ardından viral yapıyı korumak ve enfektiviteyi azaltmak için proteinleri çapraz bağlayacak bir tespit edici ekleyin.
İnkübasyon sonrası, kalıntı fiksatifleri uzaklaştırmak için yıkayın.
Virüsün etrafındaki ızgaralara bağlanan ve görüntüleme sırasında kontrastı artıran, elektron yoğunluğu yüksek bir negatif boya ekleyin.
Pipeti çıkarın ve fazla boyayı gidermek için ızgaraları kurulayın.
Kapsülü, osmiyum tetroksit ile doyurulmuş filtre kağıdı içeren bir santrifüj tüpüne yerleştirin, ardından tüpü kapatın ve buhar fiksasyonu için inkübe edin.
Osmiyum tetroksit lipid membran yapısını stabilize eder, görüntüleme kontrastını artırır ve virüsü tamamen inaktive ederek biyogüvenlik alanının dışına güvenli transfere olanak tanır.
Bir TEM tesisinde ızgaraları durulayın, havada kurumaya bırakın ve görüntüleme için saklayın.
Bu yöntem, viral örneklerin daha güvenli bir şekilde işlenmesini sağlar ve numune hazırlığını kolayla
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin