JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:24 dk. • September 30th, 2026
Cam lam üzerine yerleştirilmiş karbon kaplı bir transmisyon elektron mikroskobu veya TEM ızgarası ile başlayın.
Numunenin homojen şekilde yayılmasını sağlamak amacıyla, lamı bir hazneye yerleştirin ve karbon yüzeyi hidrofilik hale getirmek için glow discharge uygulayın.
Lamı çıkarın, ızgarayı pensle tutun ve üzerine Hepatit E virüsü (HEV) nanopartikül süspansiyonu uygulayın.
Bu nanopartiküller, rekombinant HEV kapsid proteinlerinden oluşur; nükleik asitler ve yardımcı viral proteinler içermezler.
Nanopartiküllerin grid yüzeyine adsorbe olması için inkübe edin. Ardından, fazla süspansiyonu emmek için filtre kağıdıyla kurulayın.
Adsorbe olmamış nanoparçacıkları uzaklaştırmak için ızgarayı deiyonize su ile yıkayın ve tekrar kurulayın.
Uranyl asetat boyasını ekleyin ve kısa bir süre inkübe edin.
Uranyl asetat, nanopposite parçacıkların etrafında elektron yoğunluğu yüksek bir arka plan oluşturarak TEM görüntüleme sırasında kontrastı artırır.
Fazla boyayı emdirin ve ızgarayı kuruması için bir nem alma kabinine yerleştirin.
TEM altında, HEV nanopartikülleri, viral nükleik asitlerden yoksun, tek tip, içi boş, ikosahedral yapılar olarak görünür.
TEM görüntüleme için HEV nanopartikül örneklerini 10 mM
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin