JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 4:33 dk. • September 30th, 2026
Epitelyal hücre monokatmanları içeren çok kuyucuklu bir plakayı alın ve kuyucuklara viral süspansiyon ekleyin.
Virüslerin eşit şekilde dağılması için ara sıra sallayarak inkübe edin. Virüsler hücrelere tutunur ve hücre içine girer.
Bir kuyucuğa, yarı katı bir örtü tabakası şeklinde donacak olan eritilmiş agaroz ekleyin.
Başka bir kuyucuğa, mikrokristalin selüloz bazlı viskoz sıvı bir örtü katmanı ekleyin ve inkübe edin. Viskozitesi, yarı katı örtü katmanına benzer şekilde viral difüzyonu kısıtlar.
Hücre içerisinde virüs, genomunu salar ve yeni viral RNA'lar ile proteinler üretir.
Yeni virüsler birleşir, hücrelerden dışarı çıkar ve hücre lizisine neden olur.
Serbest kalan virüsler yakınlardaki hücreleri enfekte ederek plaklar oluşturur.
Sıvı örtü katmanını aspire edin ve lizize olmamış hücreleri korumak için bir fiksatif ekleyin.
Fiksatifle beraber atın ve agaroz kaplamayı kaldırın.
Plakları boyanmadan bırakacak şekilde, canlı hücreleri boyayan bir boya ekleyin. Ardından, fazla boyayı yıkayarak uzaklaştırın.
Sıvı örtü katmanı, yarı katı örtü katmanı ile karşılaştırılabilir plak sayıları üretmekte ve plak analizlerinde bir alternatif olarak kullanımını desteklemektedir.
Ekimden bir gün sonra, d
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin