Name: C. elegans Pozitif bütanon Öğrenme, Kısa vadeli ve uzun vadeli ilişkilendirilebilir Bellek Tahliller (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-03-11T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 58 s
Description: Öğrenin, C. elegans'ta bütanon ile koşullandırma yoluyla kısa ve uzun vadeli ilişkilendirilebilir bellek test etme yöntemini. Kimotaksi ölçümleri, nörobilim ve davranış araştırmalarında bellek mekanizmalarını anlamaya yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Z. Gitai, solucanlar sayısı 13 ImageJ kullanmak için öneri ve yardım için Google SketchUp ile J. Eşref, set-up bizim ilk görüntüleme W. Ryu tavsiye için teşekkür ederim. CTM Biyomedikal Bilimler Pew Scholar, McKnight Scholar ve Keck Scholar.

<ol><li>Bargmann, C. I., Hartwieg, E., Horvitz, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odorant-selective+genes+and+neurons+mediate+olfaction+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Odorant-selective genes and neurons mediate olfaction in C. elegans.</a> Cell. 74, 515-515 (1993).</li>
<li>Ward, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemotaxis+by+the+nematode+Caenorhabditis+elegans%3A+identification+of+attractants+and+analysis+of+the+response+by+use+of+mutants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Chemotaxis by the nematode Caenorhabditis elegans: identification of attractants and analysis of the response by use of mutants.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 70, 817-817 (1973).</li>
<li>Bono, M. de, Maricq, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+substrates+of+complex+behaviors+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Neuronal substrates of complex behaviors in C. elegans.</a> Annu Rev Neurosci. 28, 451-451 (2005).</li>
<li>Mori, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+chemotaxis+and+thermotaxis+in+the+nematode+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Genetics of chemotaxis and thermotaxis in the nematode Caenorhabditis elegans.</a> Annu Rev Genet. 33, 399-399 (1999).</li>
<li>Zhang, Y., Lu, H., Bargmann, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenic+bacteria+induce+aversive+olfactory+learning+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Pathogenic bacteria induce aversive olfactory learning in Caenorhabditis elegans.</a> Nature. 438, 179-179 (2005).</li>
<li>Kauffman, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+signaling+and+dietary+restriction+differentially+influence+the+decline+of+learning+and+memory+with+age%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Insulin signaling and dietary restriction differentially influence the decline of learning and memory with age.</a> PLoS Biol. 8, e1000372-e1000372 (2010).</li>
<li>Torayama, I., Ishihara, T., Katsura, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caenorhabditis+elegans+integrates+the+signals+of+butanone+and+food+to+enhance+chemotaxis+to+butanone%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Caenorhabditis elegans integrates the signals of butanone and food to enhance chemotaxis to butanone.</a> J Neurosci. 27, 741-741 (2007).</li>
<li>Silva, A. J., Kogan, J. H., Frankland, P. W., Kida, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CREB+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">CREB and memory.</a> Annu Rev Neurosci. 21, 127-127 (1998).</li>
<li>Meyer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Iterative+image+transformations+for+an+automatic+screening+of+cervical+smears%5BTitle%5D)+AND+%22J+Histochem+Cytochem%22%5BJournal%5D)">Iterative image transformations for an automatic screening of cervical smears.</a> J Histochem Cytochem. 27, 128-128 (1979).</li>
<li>Otsu, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Threshold+Selection+Method+from+Gray-Level+Histograms%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Transactions+on+Systems%2C+Man%2C+and+Cybernetics%22%5BJournal%5D)">A Threshold Selection Method from Gray-Level Histograms.</a> IEEE Transactions on Systems, Man, and Cybernetics. 9, 62-62 (1979).</li>
<li>Brenner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genetics+of+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">The genetics of Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 77, 71-71 (1974).</li>
<li>Stephens, G. J., Johnson-Kerner, B., Bialek, W., Ryu, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dimensionality+and+dynamics+in+the+behavior+of+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Comput+Biol%22%5BJournal%5D)">Dimensionality and dynamics in the behavior of C. elegans.</a> PLoS Comput Biol. 4, e1000028-e1000028 (2008).</li>
<li>Abramoff, M. agelhaes, Ram, P. J., J, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image+Processing+with+ImageJ%5BTitle%5D)+AND+%22Biophotonics+International%22%5BJournal%5D)">Image Processing with ImageJ.</a> Biophotonics International. 11, 36-36 (2004).</li>
</ol>

C. elegans koku alma ilişkisel öğrenme ve hafıza testleri burada yığdığı öğrenme, aralıklı öğrenme, kısa süreli hafıza, ve uzun vadeli bellek süreçleri arasında ayrım sundu. Bu testlerin çevreleri 1,2, gıda ve kimyasal kokular anlamda ve bu ikisi arasındaki olumlu dernek kurma solucanlar yeteneklerine güveniyor. 6 Bu nedenle, testleri hayvanların başlayan nüfus açlık çok hassas ve büyük bir titizlikle solucanlar eğitim öncesi ve sonrasında iyi beslenmesini garanti altına alınacak. Tek kümelendiği eğitim, kısa vadeli ilişkisel bellek verir. Klima, dönemlere ve aralıklı eğitim paradigması artan sayıda C. uzun vadeli çağrışımlı bellek ulaşmak için kritik önem taşımaktadır elegans diğer organizmalar olduğu gibi 6,8 Belki de bu testte farklı klimalı ve koşulsuz uyaran arasındaki ilişkileri uzun vadeli anılarını üretmek için değişiklik olabilir. Ilişkisel öğrenme ve hafıza testleri yaşlanma veya genetik mutant hayvanlar vahşi tip öğrenme ve bellek yeteneklerini karşılaştırmak için kullanılabilir. Örneğin, ilişkisel öğrenmeyi ve yabani tip solucanlar yaşlanma uzun vadeli çağrışımlı hafıza yeteneklerine düşüş, öğrenme azalmış insülin sinyalizasyon, öğrenme ve bellek ile hayvanlarda yaş ile birlikte uzun süre muhafaza ederken calorically kısıtlanmış hayvanlar yaş ile birlikte uzun süre korunur . 6 Bu testlerin de RNAi tedavi veya C farmakolojik manipülasyon için uygun elegans. Örneğin, solucanlar, daf-2 RNAi ile tedavi artırır kısa ve uzun vadeli çağrışımlı bellek; tersine, aralıklı eğitim sırasında gen transkripsiyonu ve protein sentezi (aktinomisin D ve sikloheksimid, sırasıyla) ilaçlar ile tıkanması uzun vadeli bellek oluşumunu bozar . 6 Kısa, Uzun vadeli bellek, çağrışımlı öğrenme ayırt ve test etme yeteneğini bütün hayvanların hayatta kalması için önemli bir süreçtir, ve bir Pavlovyan dernek anısına yer moleküler makine o kadar görünür memelilere solucanlara karşı korunur. 6 Bu koku alma testleri kullanarak vadeli ve uzun vadeli bellek C. yapar daha fazla bellek çalışma için mükemmel bir sistem elegans ve insanlarda öğrenme ve hafıza kaybına yol nörodejeneratif süreçlerin içine fikir verebilir.

<table><tbody><tr><td>Sodyum Azid</td><td>Fisher Scientific</td><td>S227</td><td>Distile su içinde 1 M konsantrasyonda hazırlayın</td></tr><tr><td>Etil Alkol 190 Proof</td><td>Pharmco-AAPER</td><td>DSP-CT-18</td><td>&amp;gt;%95 Etanol, kemotaksi analizlerini etkileyebilecek safsızlıklar içerebilir</td></tr><tr><td>2-Butanon %99+</td><td>Acros Organics</td><td>14967-0010</td><td></td></tr><tr><td>Basler IEEE-1394/FireWire Alan Tarama CMOS Kamera</td><td>Edmund Scientific</td><td>NT56-683</td><td></td></tr><tr><td>InfiniMite Video Lensi &amp;#8211; Alpha Industrial</td><td>Edmund Scientific</td><td>NT56-202</td><td></td></tr><tr><td>Dolan-Jenner MI-150 Fiber Optik Aydınlatıcı</td><td>Edmund Scientific</td><td>NT55-718</td><td></td></tr><tr><td>8&amp;#8221; x 8&amp;#8221; Arka Aydınlatma</td><td>Schott AG</td><td>A08927</td><td></td></tr><tr><td>Standart Bomlu Stand</td><td>Edmund Scientific</td><td>NT54-120</td><td></td></tr><tr><td>Bomlu Standlar için 3/4&amp;#8221; Direk Adaptörü</td><td>Edmund Scientific</td><td>NT54-124</td><td></td></tr><tr><td>Standart Sabit 1/4-20 Montaj Plakası</td><td>Edmund Scientific</td><td>NT54-122</td><td></td></tr></tbody></table>

c. elegans pozitif bütanon Öğrenme, kısa vadeli ve uzun vadeli ilişkilendirilebilir bellek tahliller

C. elegans Positive Butanone Learning, Short-term, and Long-term Associative Memory Assays

Deneyimler ve öğrenilen bilgilerin bellek organizmaların hayatta kalma yardım seçimler yapmak için kritik C. elegans, gıda ve kimyasal kokular 1, 2 nöron spesifik algılama ile çevresi gider ve kimyasal kokular 3, sıcaklık 4, bir besin kaynağı 5 patojenite ile besleyici devletler ilişkilendirebilirsiniz . Burada, C. elegans ilişkisel öğrenme ve kısa ve uzun vadeli çağrışımlı hafıza testleri açıklar. Bunun yerine olumlu bir yanıt üretmek için bir caydırıcı koku alma bir öğrenme paradigması 6 değiştirilmiş; tahlil ~ 400 solucanlar açlıktan sonra AWC nöron algılanan (düşük kemotaktik indeksi ortaya çıkarır konsantrasyonda uçucu kemoatraktan bütanon benzer varlığı, solucanlar beslenme Toroyama ve ark. 7). Standart bir nüfus assay1 testler solucanları hemen odorant veya klima sonra saat birkaç dakika için &#39;cazibe kemotaksis. Bütanon artar klima, yabani tip hayvanların kemotaksis sonra ~ 0.6 Kemotaksis İndeksi üniteleri, &quot;Öğrenme Endeksi&quot;. Ilişkilendirilebilir öğrenme, eğitim sırasında hem de yiyecek ve butanon varlığına bağlıdır. Tek bir klima döneminde (&quot;massed eğitim&quot;) için yiyecek ve butanon Eşleştirme ~ 2 saat süren kısa vadeli çağrışımlı bellek üretir. (&quot;Aralıklı eğitim&quot;) arasında dinlenme süreleri ile birden fazla klima süreler, uzun vadeli ilişkisel bellek (&lt;40 saat) verim ve cAMP Tepki element bağlayıcı protein (CREB), 6 boyunca uzun süreli bellek için gerekli bir transkripsiyon faktörü bağımlı türler 8 Bizim protokolü aynı zamanda, hızlı ve doğru bir şekilde belirlenmesi için kemotaksis endeksleri görüntü analiz yöntemleri içerir. Kemotaksis assay tabaklarda hayvan Yüksek kontrastlı görüntüler MatLab solucan sayma yazılım tarafından yakalanır ve analiz edilir. Bu yazılım bir morfolojik tophat dönüşüm kullanarak düzensiz arka plan düzeltir. 9 Otsu Kullanıcı yöntemi daha sonra arka plan ayrı solucanlar bir eşik belirlemek için kullanılır.. 10 Çok küçük parçacıklar olmayan-solucan bölgelerde (plaka kenarlar veya agar yumruklar) otomatik olarak kaldırılır ve daha büyük olan. manuel seçim kaldırıldı. Yazılım sonra belirli bir maksimum boyutu üzerinde olduğu bölgelerde kalan bölgelerin ortalama boyutu göz ardı ederek ve tek bir solucan boyutunu tahmin ediyor. Solucanlar sayı daha sonra tahmini boyutu tek bir solucan solucanlar tarafından işgal edilmiş olarak tanımlanan toplam alana bölünmesi ile tahmin edilmektedir. Biz öğrenme ve kısa ve uzun vadeli bellek ayırt edilebilir olduğunu bulduk ve bu süreçlerin yüksek organizmalar ile benzer anahtar molekülleri paylaşmaktadırlar. 6,8 testlerin hızlı roman aday genler veya öğrenme ve kısa veya uzun etkileyen moleküller test edebilirsiniz C ile vadeli bellek Türler arası ilgili elegans.

Burada yöntemleri C. elegans ilişkisel öğrenme ve kısa ve uzun vadeli çağrışımlı hafıza test etmek için açıklayın. Bu nüfus Testler uçucu koku doğru chemotax solucanlar yetenekleri istihdam ve kemoatraktan bütanon gıda eşleştirme üzerine olumlu dernek kurma. Klima dönemlerinin sayısının artırılması uzun vadeli bellek neden olur.

C. elegans Pozitif bütanon Öğrenme, Kısa vadeli ve uzun vadeli ilişkilendirilebilir Bellek Tahliller

Deneyimlerin ve öğrenilen bilgilerin belleği, organizmaların hayatta kalmalarına yardımcı olacak seçimler yapmaları açısından kritik öneme sahiptir. C. elegans, çevresinde yönünü bulur...

Aşağıdaki deneyin genel amacı, model olarak C elegans kullanılarak, gıda ile kemoatraktan bütan arasında öğrenilen pozitif bir ilişkilendirmeye dair kısa ve uzun süreli hafızayı test etmektir. Bu, öncelikle senkronize edilmiş, iyi beslenmiş genç yetişkin solucanların bir saat boyunca aç bırakılmasıyla gerçekleştirilir.Ardından solucanlar, kısa süreli çağrışımsal bellek için kütle koşullanması (mass conditioning) ve uzun süreli çağrışımsal bellek için aralıklı koşullanma (spaced conditioning) yoluyla, besin ve bilinen butan varlığında eğitilir. Koşullanmadan sonra, bilinen butana doğru kemotaksi ölçülür ve naif kemotaksi ile karşılaştırılır. Bellek tutulumunu incelemek amacıyla, öğrenme indeksindeki değişikliklere dayanarak, öğrenilmiş besin-bilinen butan çağrışımının kısa ve uzun süreli çağrışımsal bellek süresini gösteren sonuçlar elde edilir.Bu yöntem; normal yaşlanma ve nörodejeneratif hastalık durumlarında nöronal fonksiyon için hangi genetik yolların gerekli olduğu ve öğrenme ile hafızanın nasıl geliştirilebileceği gibi, bilişsel yaşlanma ve hastalık alanlarındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bilişsel bozulma koşulları altında solucanlar, 1 ml OP 50 e coli ile ekilmiş 100 mm yüksekliğindeki büyüme ortamı plaklarında standart yöntemler kullanılarak hazırlanır. Plaka başına yaklaşık 5.000 veya daha az solucan yoğunluğunda genç yetişkinler kullanın.M9 tamponunu plakaya nazikçe dökerek ve solucanları serbest bırakmak için plakayı sallayarak solucanları toplayın. İstenmeyen bakterilerin yerinden çıkmasına neden olabilecek aşırı çalkalamadan kaçınmaya çalışın. Ardından, plakayı eğin ve tampon-solucan karışımını köşeden çekerek alın.P 1000 pipet kullanarak solucanları 15 mililitrelik konik tüpe aktarın. Plakada solucan kalmışsa, solucanları tüpün kenarına pipetle itmemeye dikkat edin.Bu adımı bir ila iki kez tekrarlayın. Solucanların yerçekimi ile tüpün dibine çökmesini bekleyin. En iyi sonuçlar için santrifüjleme önerilmez.Çökelti oluştuktan sonra, süpernatantı vakumla uzaklaştırın ve en az üç ila dört mililitre M nine tamponu ile yıkayın. Açlığı önlemek için hızlı çalışın. Bu prosedürü, toplamda üç yıkama olacak şekilde iki kez daha tekrarlayın.Bu aşamada, daha sonra gösterilecek olan ve solucanları eğitime önceden hazırlamak amacıyla kullanılacak kemotaksi deneylerinde kontrol grubu olarak hizmet etmek üzere bir grup solucan ayrılabilir; tüpe üç ila dört mililitre M9 tamponu ekleyin ve solucanların oda sıcaklığında bir saat boyunca aç kalmasını sağlayın. 500 mikrolitre OP50 E. coli ekilmiş 60 milimetrelik NGM plaklarının kapaklarının iç kısmına iki mikrolitre %10 butanon içeren %95 etanol sürerek koşullandırma plakalarını hazırlayın. Aç bırakılan solucanların bulunduğu tüpten süpernatantı uzaklaştırın ve her bir koşullandırma plağına 100 ila 200 mikrolitre solucan aktarmak için bir P1000 pipet kullanın. Koşullandırmanın ardından, koşullandırma plakalarını oda sıcaklığında bir saat boyunca inkübe edin.Solucanları plakalardan yaklaşık 1 mL M9 tamponu ile yıkayın ve 15 mL'lik konik bir tüpe aktarın. Tampon berrak görünene kadar daha önce gösterilen nazik yıkama yöntemlerini tekrarlayın. Yıkama işlemi tamamlandıktan sonra, ek zaman noktalarını temsil eden plakaları hazırlamak amacıyla, 1x mast çağrışımsal öğrenmesi için zaman sıfır grubu olarak hizmet edecek bir grup solucan ayrılabilir ve kemotaksi analizinde test edilebilir.100 ila 200 mikrolitre solucanı, ekim yapılmış 60 milimetrelik NGM plaklarına aktarın. Bu koşullandırma sonrası plakalarını oda sıcaklığında 0,5, 1 veya iki saat inkübe edin. Her zaman noktasından sonra solucanları plakalardan 15 mililitrelik konik bir tüpe nazikçe yıkayarak aktarın ve bu işlemi bir ila iki kez daha tekrarlayın.M9 tamponu ile aynı nazik yıkama prosedürleri uygulandıktan sonra, kısa süreli çağrışımsal bellek, daha sonra gösterilecek olan kemotaksi testi kullanılarak test edilir. Koşullandırma plakalarını ve solucanları kısa süreli eğitim için gösterildiği şekilde hazırlayın, ancak solucanların oda sıcaklığında yalnızca 30 dakika inkübe edilmesine izin verin. İnkübasyonun ardından, solucanları daha önce gösterildiği gibi toplayın.Bunları EKİLMEMİŞ 60 milimetrelik NGM plaklarına aktarın. Solucanları oda sıcaklığında 30 dakika boyunca ekilmemiş plaklarda aç bırakın. Solucanlar aç bırakıldıktan sonra, solucanları M nine tamponu ile yıkayın ve tekrar 15 mililitrelik konik tüpe yerleştirin. Toplam yedi kondisyonlama bloğu ve altı aç bırakma bloğu tamamlanana kadar bu adımları tekrarlayın.Koşullandırma tamamlandığında, solucanları koşullandırma plakalarından yıkayarak tekrar konik bir tüpe aktarın. Daha önce gösterildiği gibi, koşullandırmanın hemen ardından yedi farklı zaman aralığında ilişkisel öğrenmeyi test etmek için bir solucan grubu kullanılabilir. Geriye kalan solucan popülasyonunu, bir mililitre OP 50 içeren 100 milimetrelik HGM plakalarına aktarın.Popülasyonu destekleyecek kadar bakteri olduğundan emin olmak için her plakaya tekrar 100 ila 200 µL solucan uygulayın. Gıda-butan ilişkisinin uzun süreli çağrışımsal belleğini test etmek amacıyla, uzun süreli çağrışımsal bellek zaman noktalarını temsil eden 16, 24 veya 40 saat boyunca, kondisyonlama sonrası plakaları 20 °C'de inkübe edin. Solucanları plakalardan nazikçe 15 mL'lik konik bir tüpe yıkayın ve her zaman noktasından sonra M9 tamponu ile tekrar bir ila iki kez yıkayarak solucanları kemotaksi deneyinde test edin.Kemotaksi analiz plakalarını hazırlamak için, yerleştirilmemiş 100 milimetrelik NGM plakalarının altına, burada görüldüğü gibi yan tarafa yakın üç noktaya işaretler koyun. Koku maddesi ve kontrol noktalarına bir mikrolitre bir molar sodyum azid damlatın. Felç edici ajanların difüzyonunu en aza indirmek için bu işlemi analiz başlangıcından en fazla 15 dakika önce yapın.Sıradaki adımda, işaretli analiz plağındaki uygun noktalara %95 etanol ve %10 butonon'dan birer mikrolitre damlatın. Bu işlem, daha önce damlatılmış sodyum azid'in üzerine uygulanmalıdır. Çökmüş solucanların bulunduğu tüpten M 9 tamponunun mümkün olduğunca fazlasını uzaklaştırın.Deney plakasının başlangıç noktasına, önceden kesilmiş uçlu bir P 20 pipet kullanarak üç beş mikrolitrelik aralıklarla toplam 15 µL solucan aktarın. Ardından, bir Kim wipe köşesini küçük bir uç oluşturacak şekilde bükün ve agar tabakasını delmemeye dikkat ederek fazla M9 tamponunu bununla emdirin.Fazla tamponun uzaklaştırılması, solucanların assay plakasına salınmasını sağlar. Solucanları saymak için görüntüleme kullanılıyorsa, bu salım işleminden hemen sonra başlangıç noktasının çekilen bir görüntüsü, bir assay plakasındaki toplam hayvan sayısını verecektir. Kemotaksi assay plakasını inkübasyondan sonra oda sıcaklığında bir saat boyunca inkübe edin; ardından başlangıç noktasındaki, etanol ve buton lekelerindeki solucan sayısının yanı sıra assay plakasındaki toplam solucan sayısını belirleyin.Genellikle sodyum azid ile felç edilen solucanlar, damlatılan noktaların bir santimetrelik yarıçapı içinde olacak ve dümdüz görünecektir. Birçok hayvanın üst üste yığıldığı durumlarda, solucanlar elle sayılabileceği gibi görüntüleme ve analiz yazılımları kullanılarak da miktarları belirlenebilir. Sonuçların kolaylığı ve güvenilirliği açısından biz ikincisini tercih ediyoruz.Başlangıçtaki etanol ve butone lekelerindeki solucanlar sayıldıktan sonra, burada görüldüğü gibi KeyAx indeksi hesaplanır. %10 Butone'ye yanıt veren vahşi tip solucanlar için tipik saf kemotaksi indeksi yaklaşık 0,2'dir. Kütle veya aralıklı eğitim, genellikle sıfırıncı zamandaki KEMOTAKSİ indeksini 0,7 ile 0,8'e yükselterek yaklaşık 0,6'lık bir öğrenme indeksi sağlar.Saf kemotaksi, solucanların uygun bakımına karşı oldukça hassastır. Bu şekil, iyi beslenmiş ve aç bırakılmış saf solucanlar arasındaki CI'daki belirgin farkı göstermekte ve doğru tekniğin önemini vurgulamaktadır. Hafıza tutulumu, yabani tip hayvanlarda öğrenme indeksi sıfıra eşit olduğunda, kemotaksi indeksinin saf seviyelere dönmesi için geçen süre ile yansıtılır.Kısa süreli ilişkisel bellek, yaklaşık iki saat süren kitle eğitiminden bir saat sonra azalmaya başlar ve karşılaştırmalı olarak transkripsiyon faktörü Creb'den bağımsızdır. Uzun süreli ilişkisel bellek ise genellikle, 40 saate kadar süren alan eğitiminden 16 saat sonrasına kadar belirgin bir azalma göstermez ve Creb bağımlıdır. Bu prosedür uygulanırken, kemotaksi deneylerinin açlıktan veya ortamdaki aşırı kokulardan etkilenebileceği ve ayrıca belleğin ve solucanların aşırı fiziksel ajitasyonla bozulabileceği unutulmamalıdır.

c-elegans-positive-butanone-learning-short-term-long-term-associative

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Burada uzun süreli koku adaptasyon moleküler okuma...

Uzun vadeli Olfaktör İntibak A Moleküler Saati<em&gt; C. elegans</em

Bu video, akut toksisite tedavisini test eden veya genetik bir suşu toksik bir duruma direnç açısından test eden kısa süreli bir sağkalım testini tanıtmaktadır. Örnek protokol, solucanların paraquat (PQ) tarafından indüklenen oksidatif strese direnme yetenekleri açısından test edildiği örnek bir hayatta kalma testini göstermektedir.

C. elegans Hayatta Kalma Testi: Kısa Süreli Bir Toksisite Testi

Bu video, C. elegans'ın mekanosasyonu değerlendirmek ve alışmaya kadar geçen süreyi ölçmek için davranışsal bir yöntemi olan dokunma alışkanlığı testini tanıtmaktadır.

Dokunma Alışkanlığı Testi: C. elegans'ta İlişkisel Olmayan Öğrenmeyi İncelemek İçin Bir Yöntem

Niceliksel kemotaktik tepkiyi değerlendirmek için bir...

C. elegans Kemotaksis Deneyi

Bu protokol, kur şartlama denilen bir Drosophila öğrenme ve bellek deneyi tanımlar. Bu klasik tahlil, resepsiyona açık olmayan prematüre bir kadının cinsel reddetmesinden sonra erkek kovuşturma davranışının azaltılmasına dayanmaktadır. Davranışsal esnekliğin bu doğal biçimi, öğrenmeyi, kısa vadeli belleği ve uzun süreli belleği test etmek için kullanılabilir.

Öğrenme ve Bellek Tedrisi Olan Drosophila Kurbanlığı İklimlendirme

Nematodun, Caenorhabditis elegans'ın , nüfusa dayalı bir deneyde çözünür bileşikler için tercihinin otomatik analizini sağlayan bir davranış kayıt kurulumu ve protokolü sunuyoruz. Bu makale bir davranış odasının inşasını, davranışsal analiz protokolünü ve video analiz yazılımının kullanımını anlatıyor.

Nematod Popülasyona Dayalı Kemoterapi Tercihi Testinin Otomatik Analizi

Burada sunulan protokol, eşzamanlı elektroensefalografi (EEG) ve gerçek zamanlı olarak davranışsal değerlendirme hakkında bilgi sağlar. Bu protokolde yer alan tüm adımları, özellikle öğrenme ve hafıza alanlarında, nörobilimin birçok alanındaki araştırmacılar için cazip bir çözüm olarak tartıştık.

Hipokampal nörogenezi incelemek için bir araç olarak kablosuz elektrofizyoloji ve hafıza davranış testinin eşzamanlı izlenmesi

Daha önce Caenorhabditis elegans'ın sırasıyla kitlesel ve aralıklı eğitim yoluyla kısa ve uzun vadeli ilişkisel anılar oluşturması için protokoller geliştirdik. Burada, C. elegans'ın koşullandırılması için, 1-propanol ve hidroklorik asidi, sırasıyla koşullu ve koşulsuz uyaranlar olarak eşleştirerek, engelleyici ilişkisel hafıza oluşturmak için ayrıntılı protokoller açıklanmaktadır.

Caenorhabditis elegans'ta İki Kimyasalın Eşleştirilmesiyle Engelleyici İlişkisel Öğrenme ve Hafıza Oluşumu

Burada, model organizma C. elegans'ta klasik koşullandırma gerçekleştirerek ilişkisel öğrenmeyi test etmek için bir protokol sunuyoruz. Paradigma, ortamdaki tuz konsantrasyonunu, kemotaksislerini tuza doğru veya tuzdan uzaklaştıran gıdanın varlığı veya yokluğu ile eşleştirmeye dayanır.

Nematod Caenorhabditis elegans'ın Kemotaksisinde İlişkisel Öğrenmenin Ölçülmesi

C in vivo Lazer Axotomy elegans

Öğrenin, C. elegans'ta bütanon ile koşullandırma yoluyla kısa ve uzun vadeli ilişkilendirilebilir bellek test etme yöntemini. Kimotaksi ölçümleri, nörobilim ve davranış araştırmalarında bellek mekanizmalarını anlamaya yardımcı olur.

C. elegans Pozitif bütanon Öğrenme, Kısa vadeli ve uzun vadeli ilişkilendirilebilir Bellek Tahliller

Daha fazla video keşfet