Lineage Labeling of Zebrafish Cells with Laser Uncagable Fluorescein Dextran

Joshua A. Clanton; Ilya A. Shestopalov; James K. Chen; Joshua T. Gamse

doi:10.3791/2672

Lazer Uncagable Floresein Dextran'ın Zebra balığı Hücre Lineage Etiketleme

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Lineage Labeling of Zebrafish Cells with Laser Uncagable Fluorescein Dextran

Lazer Uncagable Floresein Dextran'ın Zebra balığı Hücre Lineage Etiketleme

Full Text

14,345 Views

07:35 min

April 28, 2011

DOI: 10.3791/2672-v

Joshua A. Clanton¹, Ilya A. Shestopalov², James K. Chen², Joshua T. Gamse¹

¹Department of Biological Sciences,Vanderbilt University, ²Department of Chemical and Systems Biology,Stanford University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Bu protokol, Uncaged floresein gelen sinyali yükseltmek için immunolabeling tüm montaj takip kafesli flöresein UV uncaging kullanarak hücrelerin zebrafish embriyoların küçük gruplar kaderi etiket ve takip etmek için bir yol çizer.

Bu prosedürün genel amacı, bir zebra balığı embriyosundaki hücreleri soy etiketlemektir. Bu, önce kafesli floreseinin sentezlenmesi ve zebra balığı embriyolarına enjekte edilmesiyle gerçekleştirilir. Embriyolar daha sonra agarroya monte edilir, böylece etiketlenecek hücrelere erişilebilir.

Daha sonra, embriyonun seçilen hücrelerinde kafesli floreseini aktive etmek için bir UV lazer kullanılır. Son olarak, embriyolar istenen aşamaya geldikten sonra toplanır ve etiketli hücreler belirli soyların belirteçleri ile ilişkili olarak tespit edilir. Sonuç olarak, foto kafesleme ve immünofloresan mikroskobu ile embriyolarda seçilen hücrelerin kaderini gösteren sonuçlar elde edilebilir.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos