Name: Bir In vivo Kemirgen Model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-11T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 8 s
Description: Öğrenin, sıçan dorsi fleksör kaslarında kasılma kaynaklı yaralanma oluşturma ve tork ölçümleri ile manyetik rezonans görüntüleme kullanarak fonksiyonel ve yapısal değişiklikleri izleme yöntemini.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazarlar Maryland Translasyonel Görüntüleme (C-TRIM) ve Manyetik Rezonans Araştırma Merkezi (MRRC) Çekirdek laboratuvar alanı ve tesisleri ve Dr. Rao Gullapalli ve Da Shi yaptığı cömert bağış için Dr Robert Bloch teşekkür etmek istiyorum teknik destek için. Bu çalışma, Jain Vakfı JAR Sağlık (K01AR053235 ve 1R01AR059179) Ulusal Sağlık Enstitüleri ve Müsküler Distrofi Derneği (# 4278), ve hibe RML bağışları ile desteklenmiştir.

1 in vivo yaralanma Model ve izometrik tork ölçümü. <ol><li> Bu prosedürler, sıçan ve fareler 7,17,18 için kullanılabilir . Başlamak için, hassas bir buharlaştırıcı (kedi # 91.103, Veteriner Equip, Inc, Pleasanton inhalasyon anestezi (~% 4-5, bir indüksiyon odasında indüksiyonu için izofluran daha sonra bakım için bir roket ucu konisi yoluyla izofluran% 2 ~) altında hayvan yatar , CA). Kurumasını kornealar korumak için her gözün steril oftalmik krem ​​(Paralube Veteriner Merhem, PharmaDerm, Floham Park, NJ) uygulayın. İşlem sırasında, hayvan, kafes dışına yerleştirilmiş bir ısı lambası kullanımı ile sıcak tutulur ve her zaman hayvan en az 6 inç tuttu. </li><li> Hazırlık cilt, saç kaldırarak ve yumuşak doku veya kemik içine tohumlama cilt bakterileri önlemek için betadin ve% 70 alkol scrubs alternatif temizleme. , Derin tendon refleksi eksikliği (ayak kısma yanıt ayak çekme) tarafından uygun anestezi onaylayın. Ekstremite (25G veya 27G fare) platformu üzerine stabilize etmek için elle proksimal tibia boyunca iğne yerleştirilir. İğne bacağın ön kompartman girmemeniz gerekir. </li><li> Iğne, hayvan yatar ve ayak parmakları düz yukarı bakacak şekilde olduğu gibi sabit bir pozisyonda kilitleyin. Ismarlama cihaz, iğne, güvenli ve dolayısıyla bacak stabilize etmek için kullanılır. </li><li> Bacak, ayak, özel işlenmiş footplate (Şekil 1) üzerine yerleştirin. Footplate eksen step motor (T8904 modeli, NMB Teknolojileri, Chatsworth, CA) ve tork sensörü bağlı (model QWFK-8M, Sensotec, Columbus, OH). Ayak Şekil 1'de olduğu gibi başlangıçta, bu nedenle tibia dik hizalanmış olmalıdır. </li><li> Transkutanöz elektrotlar (723.742, Harvard Apparatus, Cambridge, MA) veya subkutan elektrotlar (J05 İğne Elektrot İğneler, 36BTP, Jari Elektrod Kaynağı, Gilroy, CA), sinir yatıyor fibula, boyun yakın fibula siniri uyarmak için kullanın. yüzeysel bir pozisyon. Görme ayak güvenli önce (sıçan, fare ve 1 ms darbe 0.1 ms pulse) tiki bir dizi yaparak izole dorsifleksiyon onaylayın. Sonra ayak seğirme genlik gerilim artışa yanıt olarak bir artış olduğunu karşıt kasları (plantar) aynı anda uyarılmış değildir, yapışkan bant ile footplate teyit sabitlenir. </li><li> Yaralanma öncesi ve bir yaralanma sonrasında seçilen zaman noktalarında, dorsifleksörlerin üretim kapasitesi maksimal kuvvet, "maksimum izometrik tork" (kas uzunluğu bir değişiklik olmadan tork) olarak kaydedildi. Tork ölçümleri hasara yol için kullanılan aynı teçhizat yapılmaktadır. Maksimal izometrik tork kaydetmeden önce, darbe genlik seğirme gerginlik ve ayak bileği en uygun konumunu optimize etmek için ayarlanabilir dorsifleksör farklı uzunluklarda seyirmesi vererek belirlenir. Dorsifleksör (dinlenme süresini, aka Lo) optimal uzunluğunu belirlemek için açılı bir tork eğrisi elde ettikten sonra, aşamalı olarak 200 ms puls sırasında bakliyat sıklığı artan bir tork frekans arsa ile elde edilir. Maksimal erimiş tetanik kasılma genellikle 90-100 Hz'de elde edilir. Üç ayrı seyirmesi ve tetanik kasılmaları kaydedilir ve daha fazla analiz için kaydedilir. </li><li> Kontraktil aktivasyon, ayak bileği dönüş başlangıcı, senkronize etmek ve tork veri toplama (Labview sürüm 8.5, National Instruments, Austin, Teksas) ticari yazılımı kullanın. Dorsifleksör kasların uyarılması, bilgisayar kontrollü motor aynı anda, böylece uzatma daralma (aynı zamanda kas yaralanması neden olan, "eksantrik" bir daralma olarak da adlandırılır), plantar fleksiyonda footplate hareket ederken ortaya çıkar. Belirli bir protokol araştırmacı tarafından istenilen yaralanma istenilen büyüklüğüne bağlıdır. Büyüklüğü, yaralanma veya doku hasarı, açısal hız, kas aktivasyonunun zamanlaması, eklem hareket açıklığı, ve uzatma kasılmaları sayısı gibi değişkenler manipülasyonu ile düzenlenir. </li><li> Hasara yol için maksimal izometrik kasılma, hareket açıklığı, uzama hızı, ve gerektiği gibi stimülasyon zamanlama değişen üzerine bir uzatma daralma üst üste. Örneğin, dorsifleksör maksimal izometrik kasılma elde edilir ve 200 ms sonra yaklaşık normal hareketi (900 ° / sn) seçilen bir hızda uzatılmış. Hareket ve uzatma derecesi bir yaralanma 14 elde edilmesinde önemli faktörlerdir önce daha önce bu aktivasyon göstermiştir . Dorsifleksör tarafından üretilen tork çoğunluğu TA 11 ve daha önce gösterilen bu model, bu kas 5,13-15 yaralanması sonuçları . TA uzatma boyunca uyarılmış kalır. </li><li> Yaralanma sonrası, hayvan cihazdan kaldırılır. Tibial pinkaldırılmış, bacak tekrar temizlenir ve hayvan kafesine geri döndü (37 ° C sıcaklık kontrollü bir ısıtma bloğu yerleştirilen) ve kurtarma kadar izlenir. Hayvan uyanık ve hareketli kadar bu bekleme içerir. Hayvanlar işlem sırasında herhangi bir gözlemlenebilir ağrı acı ve uzatma kasılmaların neden olduğu yaralanma sonrası yürüyüş görünür değişiklikler (örneğin topallık) vardır. Ancak, uygun anti-ağrı tedavi (cerrahi sonrası 48 saat süreyle 0.1 mg / kg her 12 saatte bir buprenorfin 0.05) daha sonra uygulanır. </li></ol> 2. tüm kas gerginliği yerinde ölçümü. <ol><li> Hayvan hazırlanan ve 1.3 ile bölüm 1.1 'de yukarıda açıklandığı gibi tibia stabilize edilir. Tüm enstrümantasyon uygun kalibrasyonu için test öncesinde en az 30 dakika açık ve kuvvet dönüştürücü termal sürüklenme en aza indirmek için. </li><li> İnsizyon cilt anterior ayak bileği ve tibialis anterior kas (TA) tendon sever. Tendon dikkatlice 4.0 Ethicon ipek emilmeyen sütür kravat ve yük hücresi) S-hook (ağırlığı = 0.1g), model FT03, Çim Aletleri, Warwick, RI ile Vicryl dikiş ekleyiniz. Alternatif olarak, özel bir kelepçe (ağırlığı = 0.5g) Vicryl dikiş (Şekil 2) tendon takmak için kullanılabilir. </li><li> Yük hücresi TA (kökeni ve ekleme arasında düz bir çizgi çekin) dinlenme uzunluğu ayarlanabilir ve hizalanmamış olabilir, böylece bir mikromanipülatör (Uçurtma Manipulator, Dünya Precision Instruments Inc, Sarasota, FL) monte edilir. TA, bir ısı lambası ve, mineral yağ ile dehidratasyon soğutma korunmaktadır. Yük hücresi (her test öncesi kalibre) gelen sinyaller, satın alma yazılımı (sürüm 2.1 PolyView, Çim Instruments tarafından toplanan ve saklanan bir A / D kurulu bir DC amplifikatör (modeli P122, Çim Aletleri, Warwick, RI) ile beslenir Warwick, RI). </li><li> TA yük hücresi takın ve L 0 belirlemek amacıyla farklı kas uzunlukları tek tiki (1 ms dikdörtgen darbe) uygulamak. Kaliperler kullanarak ölçülen kas dinlenme süresini, tibial tüberkül ve myotendinous kavşak arasındaki mesafe olarak tanımlanır. Bu uzunluk, yavaş yavaş bir güç-frekans ilişkisi kurmak için darbe genlik ve sonra nabız frekansı artar. Maksimum erimiş tetanik kasılma yaklaşık 90-100Hz (300 ms tren süresi 0,1 ms veya 1 ms bakliyat oluşan) elde edilir. Maksimum uyarılma yoğunluğu% 150 maksimal kasılma aktivasyonu (P 0) ikna etmek için TA etkinleştirmek için kullanın. Maksimal tetanik kasılmaların istediğiniz herhangi bir nokta, zaman içinde bir yorgunluk indeksi, P 0 yüzdesi olarak defalarca yapılan ve ifade edilebilir . </li></ol> 3 in vivo MR görüntüleme ve / veya kemirgen iskelet kaslarında spektroskopi. Tüm MRG ve MRS Bruker Biospin (Billerica, MA) Paravision 5.0 yazılımı çalıştıran bir 12 cm degrade ekleme (660 mT / m maksimum degrade, 4570 T / m / s maksimum yetişme hızı) ile donatılmış olan 7.0 Tesla MR sistemi yapılır. <ol><li> 1.1 'de yukarıda açıklandığı gibi izofluran buharlaşmış hayvan anestezi. Bir MR-uyumlu küçük hayvan izleme ve yolluk sistemi (SA Instruments, Inc.), Solunum hızı ve vücut ısısı izlemek için kullanılır. Fare vücut ısısı 36-37 ° C sıcak su sirkülatör kullanılarak korunur. Ismarlama bir fare sahibi her iki bacakta diz ayak mıknatısın delik paralel yatar pozisyonda konumlandırmak için kullanılır. Rezonatör 72 mm doğrusal 1H içinde dört-kanallı alma sadece yüzey bobini yerleştirilir. Rezonatör bobin ayarlı ve örnek eşleştirilir. </li><li> MR Görüntüleme: yerelleştiriciler sonra, aşağıdaki MR taramaları yapılmaktadır: Aşağıdaki parametreler ile rahatlama donanım ile T1 ağırlıklı hızlı iktisabı (NADİR): TE = 9.52 ms, TR = 1800, eko trenin uzunluğu = 4, düzlem çözünürlüğü 100x100 mikron ve dilim kalınlığı = 750 mm. Çift-eko PD/T2 NADİR: TE = 19.0/57.1 ms, TR = 5000 ms, eko trenin uzunluğu = 4, düzlem çözünürlüğü 100x100 mm, kesit kalınlığı = 750 mm. Spin eko (SE): b-değeri = 350 s / mm -2, TE = 26 ms, TR = 4500 ms, düzlem çözünürlüğü 150x150 mm, kesit kalınlığı = 750 mm 12 sigara colinear yönde kullanarak difüzyon tensör görüntü verilerini . 16 TES ΔTE ile 182.5 ms = 11,4 ms = 11.4 ms, TR = 10000 ms, düzlem çözünürlüğü 150x150 mm, ve dilim kalınlığı 750 mikron kullanarak multi-slice multi-eko (MSME) T2 haritalama parametrik veri. </li><li> Görüntü işleme: Difüzyon tensör yeniden yapılanma ve traktografi TrackVis (Martinos için Biyomedikal Görüntüleme Merkezi, Massachusetts Genel Hastanesi, Boston, MA) kullanılarak yapılır ortalama yayınım (MD), fraksiyonel anizotropi (FA) görüntüleri yanı sıra traktografi haritaları oluşturmak için. T2 haritalama MAT yazılmış özel yazılım kullanılarak yapılır LAB (Mathworks Natick, MA) kurallı T2 sinyal denklemin her pikselin ölçülen verilerin sığması için doğrusal olmayan en küçük kareler. Faiz ölçümleri Bölgeler parametre değerleri TA içinde değerlendirmek için yapılmaktadır. </li><li> 1H spektroskopisi: Otomatik layneri TA 1 x 1 x 4 mm 3 voksel yapılır. Bir nokta çözümlü spektroskopisi (BASIN) darbe dizisi (TR / TE = 2000/18 ms) 1024 ortalamaları ile aynı voksel spektrumları elde etmek için kullanılır. Veri toplama, her bir bacak üzerinde 34 dakika. Spektral veriler LCModel paketi 16 kullanılarak işlenir. 31P spektroskopisi: Çift ayarlı (1H, 31P) yüzey bobin, in vivo spektroskopisi (ISIS) darbe dizisi seçilen görüntü kullanılarak veya lokalize spektroskopi (tek darbe deneyi kullanarak) olmayan lokalize gerçekleştirmek için kullanılır . </li></ol> 4. Hasat ve kaslar saklamak. TA, deney sonunda sonra hasat tartılır, sıvı nitrojen içinde dondurulmuş ek bileşenini ve daha sonra -80 ° C'de saklanan Bu, in vivo deneylerde sonra zaman içinde herhangi bir noktada yapılabilir . Kaslar, bu bir terminal işlemi olarak, in situ deneylerde hemen sonra hasat edilir . Detaylı morfolojik çalışmalar için, hayvan sol ventrikül ile perfüzyon üzerinden% 4 paraformaldehid ile sabittir. 5. Temsilcisi sonuçları. Şekil 3, in vivo aparat sıçan temsilcisi verileri gösterir in vivo cihazı dorsifleksör kasları tarafından üretilen maksimum tork elde etmek için kullanılır; aynı zamanda bu aynı kas yaralanması ikna etmek için kullanılır . Ayak bileği eklemi, yaklaşık 20 ° plantar (ayak ile 0 ° kabul tibia dik yerleştirilmiş) konumlandırılmış kas uzunluk-gerilim ilişkisi nedeniyle, maksimal izometrik tork genellikle oluşur. Maksimal izometrik tork elde edildikten sonra, ayak yaralanma protokolü başlamak için herhangi bir konuma yerleştirilebilir. 70 ° - Şekil 3, 0 ° ile hareket bir yay 30 tekrarlar bir yaralanma protokolü temsil eder. Izometrik faz (dolu ok) ve daralma bağlı yaralanma protokol sırasında uzatma fazı (açık ok) elde edilen tork istikrarlı düşüş dikkat edin. Tork Nmm birimleri kaydedildi, ancak mutlak değeri hayvan boyutu ve durumu (örneğin, yaralı kas, aşırı yorgunluk, kas, veya belirli bir protein homolog rekombinasyon nedeniyle eksikliği kas) bağlıdır. Şekil 4 yerinde aparat sıçan temsilcisi verileri gösterir. Yerinde aparat uzatma kasılmaları dahil değildir; bunun yerine bize maksimum gerilimi bilinen bir uzunlukta ayrı bir kas tarafından üretilen izole düzgün hizalamak ve ölçmek için sağlar. Şekil 4 kademeli bir sıçan tibialis anterior kas yorulma testi sırasında meydana gelen kuvvet kaybı gösterir. Bu özel örnekte, titanic kasılmaları 5 dakika boyunca her saniyede bir kere yapıldı. Gerilim (kuvvet), genellikle Newton (ya da gram), ama tork gibi, mutlak değer, hayvanın boyutuna ve durumuna bağlıdır. Kas ağırlığı hemen bu işlemden sonra elde olduğundan, kuvvet, kas çapraz kesit alanı ("özel kuvvet" olarak adlandırılır) normalize edilebilir. Şekil 5 T1 ve T2 parametrik haritalama gibi temsili bir fare in vivo görüntüleme veri (A), difüzyon tensör görüntüleme (B), 1 H spektroskopisi (C), ve 31 P spektroskopi 3D traktografi gösterir. Detaylar rakam efsanesi verilmiştir. <img src="/files/ftp_upload/2782/2782fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1: in vivo aparat .* yaralanma üretmek için, tibia stabilize ve ayak motorlu plaka takılı. Footplate ayak plantar fleksiyon (noktalı ok) güçleri ise ayak bileği dorsifleksör fibula sinir ile uyarılır. * Lovering &amp; De Deyne, izni ile kullanılmaktadır J Biyomekanik 2005,. <img src="/files/ftp_upload/2782/2782fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2: yerinde aparat yük hücresi TA dinlenme uzunluğu ayarlanabilir ve X, Y ve Z yönlerinin düzgün hizalanmış olabilir böylece mikromanipülatör monte edilir. TA distal tendon yük hücresi bağlı ve tek tiki L 0 belirlemek amacıyla farklı kas uzunluklarında indüklenen. Maksimal kasılma aktivasyon (P 0) belirlemek için maksimal tetanik kasılma elde edilir. Maksimal tetanik gerginlik bir zaman istenilen noktada yorgunluk indeksi, P 0 yüzdesi olarak defalarca yapılan ve ifade edilebilir. 782/2782fig3.jpg "alt =" Şekil 3 "/&gt; Şekil 3: sıçan kasılmaları uzatma tork in vivo aparat Temsilcisi iz kayıtları veri Tork. Bu özel örnekte, kaslar (açık ok) 900 açısal hızda hareket 70 ° yayı üzerinden footplate uzatma önce bir tepe izometrik kasılma (dolu ok) ikna etmek için 200 milisaniye için uyarılır ° / s <img src="/files/ftp_upload/2782/2782fig4.jpg" alt="Şekil 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 4"> Şekil 4: Gerilim yerinde aparat Temsilcisi verileri bir sıçan tibialis anterior kas (TA) tekrar uyarılması sırasında maksimal izometrik tetanik gerilim düşüş gösteren veriler. Bu örnekte, TA optimal uzunluğu (L 0) ayarlanabilir, izole edilmiş ve daha sonra 5 dakika boyunca saniyede bir 200 ms tetanik kasılma ile uyarılır . <img src="/files/ftp_upload/2782/2782fig5.jpg" alt="Şekil 5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 5"> Şekil 5: in vivo görüntüleme görüntüleri tibialis anterior kas (TA) T1 ve T2 parametrik haritalama enine (eksenel) bölümleri göstermektedir. Noktalı kırmızı kutu göstermek için TA çevreleyen artan yaralı T2 (sol taraf) artış karşı yaralanmamış bir şekilde (sağ tarafta) B:. Difüzyon tensör görüntüleme (DTG) Temsilcisi 3D traktografi C: bir fare TA 1 H spektrum gösterir birkaç saptanabilir lipid rezonanslar; intramiyoselüler (IMCL) ve extramyocellular lipid (EMCL) zirveleri arasında ayrım bu yöntemi kullanarak elde edilir: D phosphocreatine (PCR), inorganik fosfat (Pi), ve üç sıçan TA 31 P MR spektrum gösterir. Adenozin 5'-trifosfat (ATP) rezonanslar (α, β, γ).

<ol><li>Aldridge, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+pain+after+exercise+is+linked+with+an+inorganic+phosphate+increase+as+shown+by+31P%5BTitle%5D)+AND+%22NMR.+Biosci.+Rep%22%5BJournal%5D)">Muscle pain after exercise is linked with an inorganic phosphate increase as shown by 31P.</a> NMR. Biosci. Rep. 6, 663-663 (1986).</li>
<li>Argov, Z., Lofberg, M., Arnold, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+muscle+diseases+gained+by+phosphorus+magnetic+resonance+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Insights into muscle diseases gained by phosphorus magnetic resonance spectroscopy.</a> Muscle Nerve. 23, 1316-1316 (2000).</li>
<li>Brooks, S. V., Zerba, E., Faulkner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injury+to+muscle+fibres+after+single+stretches+of+passive+and+maximally+stimulated+muscles+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Injury to muscle fibres after single stretches of passive and maximally stimulated muscles in mice.</a> J. Physiol. 488, 459-459 (1995).</li>
<li>Burkholder, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+between+muscle+fiber+types+and+sizes+and+muscle+architectural+properties+in+the+mouse+hindlimb%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Morphol%22%5BJournal%5D)">Relationship between muscle fiber types and sizes and muscle architectural properties in the mouse hindlimb.</a> J. Morphol. 221, 177-177 (1994).</li>
<li>Hakim, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dexamethasone+and+Recovery+of+Contractile+Tension+after+a+Muscle+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Orthop.+Relat+Res%22%5BJournal%5D)">Dexamethasone and Recovery of Contractile Tension after a Muscle Injury.</a> Clin. Orthop. Relat Res. 439, 235-235 (2005).</li>
<li>Hamer, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evans+Blue+Dye+as+an+in+vivo+marker+of+myofibre+damage%3A+optimising+parameters+for+detecting+initial+myofibre+membrane+permeability%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Anat%22%5BJournal%5D)">Evans Blue Dye as an in vivo marker of myofibre damage: optimising parameters for detecting initial myofibre membrane permeability.</a> J. Anat. 200, 69-69 (2002).</li>
<li>Hammond, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+Autologous+Platelet-rich+Plasma+to+Treat+Muscle+Strain+Injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Sports+Med%22%5BJournal%5D)">Use of Autologous Platelet-rich Plasma to Treat Muscle Strain Injuries.</a> Am. J. Sports Med. , (2009).</li>
<li>Heemskerk, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+mouse+skeletal+muscle+architecture+using+three-dimensional+diffusion+tensor+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson.+Med%22%5BJournal%5D)">Determination of mouse skeletal muscle architecture using three-dimensional diffusion tensor imaging.</a> Magn Reson. Med. 53, 1333-1333 (2005).</li>
<li>Ho, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+fiber+splitting+with+weight-lifting+exercise+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Anat%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle fiber splitting with weight-lifting exercise in rats.</a> Am. J. Anat. 157, 433-433 (1980).</li>
<li>Huijing, P. A., Baan, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myofascial+force+transmission+causes+interaction+between+adjacent+muscles+and+connective+tissue%3A+effects+of+blunt+dissection+and+compartmental+fasciotomy+on+length+force+characteristics+of+rat+extensor+digitorum+longus+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Physiol+Biochem%22%5BJournal%5D)">Myofascial force transmission causes interaction between adjacent muscles and connective tissue: effects of blunt dissection and compartmental fasciotomy on length force characteristics of rat extensor digitorum longus muscle.</a> Arch. Physiol Biochem. 109, 97-97 (2001).</li>
<li>Ingalls, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dihydropyridine+and+ryanodine+receptor+binding+after+eccentric+contractions+in+mouse+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Dihydropyridine and ryanodine receptor binding after eccentric contractions in mouse skeletal muscle.</a> J. Appl. Physiol. 96, 1619-1619 (2004).</li>
<li>Lee, D., Marcinek, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+in+vivo+small+animal+MRI+and+MRS%3A+basic+experimental+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Noninvasive in vivo small animal MRI and MRS: basic experimental procedures.</a> J. Vis. Exp. , (2009).</li>
<li>Lovering, R. M., Deyne, P. G. D. e <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contractile+function%2C+sarcolemma+integrity%2C+and+the+loss+of+dystrophin+after+skeletal+muscle+eccentric+contraction-induced+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Contractile function, sarcolemma integrity, and the loss of dystrophin after skeletal muscle eccentric contraction-induced injury.</a> Am. J. Physiol Cell Physiol. 286, C230-C238 (2004).</li>
<li>Lovering, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+contribution+of+contractile+pre-activation+to+loss+of+function+after+a+single+lengthening+contraction%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomech%22%5BJournal%5D)">The contribution of contractile pre-activation to loss of function after a single lengthening contraction.</a> J. Biomech. 38, 1501-1501 (2005).</li>
<li>Lovering, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recovery+of+function+in+skeletal+muscle+following+2+different+contraction-induced+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Phys.+Med.+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Recovery of function in skeletal muscle following 2 different contraction-induced injuries.</a> Arch. Phys. Med. Rehabil. 88, 617-617 (2007).</li>
<li>Provencher, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automatic+quantitation+of+localized+in+vivo+1H+spectra+with+LCModel%5BTitle%5D)+AND+%22NMR+Biomed%22%5BJournal%5D)">Automatic quantitation of localized in vivo 1H spectra with LCModel.</a> NMR Biomed. 14, 260-260 (2001).</li>
<li>Roche, J. A., Lovering, R. M., Bloch, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+recovery+of+dysferlin-null+skeletal+muscle+after+contraction-induced+injury+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Impaired recovery of dysferlin-null skeletal muscle after contraction-induced injury in vivo.</a> Neuroreport. 19, 1579-1579 (2008).</li>
<li>Stone, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absence+of+keratin+19+in+mice+causes+skeletal+myopathy+with+mitochondrial+and+sarcolemmal+reorganization%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Absence of keratin 19 in mice causes skeletal myopathy with mitochondrial and sarcolemmal reorganization.</a> J. Cell Sci. 120, 3999-3999 (2007).</li>
<li>Van Donkelaar, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diffusion+tensor+imaging+in+biomechanical+studies+of+skeletal+muscle+function%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Anat%22%5BJournal%5D)">Diffusion tensor imaging in biomechanical studies of skeletal muscle function.</a> J. Anat. 194, 79-79 (1999).</li>
<li>Vogl, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+value+of+in-vivo+31-phosphorus+spectroscopy+in+the+diagnosis+of+generalized+muscular+diseases.+The+clinical+results+and+the+differential+diagnostic+aspects%5BTitle%5D)+AND+%22Rofo%22%5BJournal%5D)">The value of in-vivo 31-phosphorus spectroscopy in the diagnosis of generalized muscular diseases. The clinical results and the differential diagnostic aspects.</a> Rofo. 162, 455-455 (1995).</li>
</ol>

&quot;Muscle hasar&quot;, birçok şekillerde tanımlanmış ve ölçülmüştür. Yapısal hasar histolojik bulgular 6,9 bellidir, ama birçok hayvan çalışmalarında kullanılan da dahil olmak üzere kas hasarı değerlendirmek için kullanılan biyolojik belirteç bir sorun, genellikle kuvvet kaybı ile korele olmadığını. Kas hasarı genellikle incelemek için kullanılan testin kapsamında tanımlanmış ve hiç bir bulgu yaralanma sonrası kontraktilite değişiklikleri için hesap. Tam kasılma fonksiyonu yaralanma belirteçlerin varlığına...

(Tüm ekipmanlar footplate dışında fareler ve sıçanlar için aynı) <ul><li> BUD Değer Hattı Kabine (Newark, 06M4718) </li><li> Çok Fonksiyonlu l / O USB-6221M (National Instruments, 779.808-01) </li><li> Step motor kontrol (Newark, 16M4189) </li><li> Step Motor (Newark, 16M4198) </li><li> Ölçer Amplifikatör Gerilme (Honeywell, Sensotec, DV-05) </li><li> Tork Sensörü (Honeywell, QWLC-8M) </li><li> Ayak plakası ve istikrar cihazı (özel yapılan patent başvurusu) </li></ul>

bir in vivo</emdaralma indüklenen sakatlık ve kurtarma non-invaziv İzleme> kemirgen model

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

Kas suşları doktorlar tarafından tedavi edilen en yaygın şikayetlerden biridir. Ancak bir kas hasarı, genellikle hastanın öyküsü ve fizik muayene tek başına tanısı, klinik prezentasyon, kas hasarı veya kas hastalıkları, kas hasarı değerlendirmesi hastalarda yaralanma, hastanın ağrı toleransı, vb ölçüde büyük ölçüde bağlı olarak değişebilir. hassasiyet, hareket gücü, menzil ve daha yakın zamanda, görüntüleme çalışmaları gibi klinik belirtiler, genellikle sınırlı. Kas hasarı ile serum kreatin kinaz düzeyleri gibi biyolojik belirteçleri, genellikle yükselir, ancak bunların seviyelerini her zaman güç üretim kaybı ile ilişkili değildir. Bu zarar bir &quot;doğrudan ölçmek&quot; sağlayan hayvanlar, histolojik bulgular bile doğrudur, ancak fonksiyon kaybı hesabı yok. Bazı iddia, kas kasılma kuvveti genel sağlık en kapsamlı önlem. Kas hasarı çeşitli biyomekanik koşullar altında meydana gelen rastgele bir olay olduğundan, çalışmak zordur. Burada, in vivo hayvan modelinde bir tork ölçmek için üretmek ve güvenilir bir kas hasarı açıklar. Ayrıca in situ izole kas kuvveti ölçümü için model tarif. Ayrıca, küçük hayvan MRI prosedürü açıklar.

Bir<em&gt; In vivo</em&gt; Yaralanma hayvan modeli tarif edilir. Bu yöntem, fibula sinir subkutan pozisyon yararlanır. , Hız, kas aktivasyon zamanlama, hareket ark tüm önceden belirlenmiş ve ticari yazılımı kullanarak senkronize. Mesaj yaralanma değişiklikler izlenir<em&gt; In vivo</em&gt; MR / spektroskopisi kullanarak.

Bir In vivo</emDaralma indüklenen Sakatlık ve Kurtarma Non-invaziv İzleme> Kemirgen Model

Kas zorlanmaları, hekimler tarafından tedavi edilen en yaygın şikayetlerden biridir. Bir kas yaralanması tipik olarak hasta öyküsü ve fiziksel...

Bu prosedürün genel amacı, sıçan fare dorsi fleksör kaslarında in vivo olarak güvenilir bir kontraksiyon kaynaklı yaralanma oluşturmaktır. Bu işlem, proksimal tibia üzerinden küçük ayarlı bir pim yerleştirilerek gerçekleştirilir. Daha sonra bacak, aparat üzerinde stabilize edilir.Üçüncü adım, peroneal sinirin uygun şekilde stimüle edildiğini doğrulamaktır. Son olarak, tork ölçümleri elde etmek ve yaralanmaya yol açan uzama kontraksiyonlarını gerçekleştirmek için ayak, bir ayak plakasına sabitlenir. Nihayetinde, yeniden testler, tork ve/veya manyetik rezonans taramaları kullanılarak fonksiyon ve yapıdaki değişiklikleri gösteren sonuçlar elde edilebilir.Laboratuvarımızda, iskelet kası kontraktil fonksiyonunu değerlendirmek için birkaç farklı teknik kullanıyoruz. TBIs anterior gibi izole bir kasın kütle uzunluğunu ve maksimal gerilimini belirlemek istediğimizde "inside shoe" yöntemi kullanılır. In vivo tekniğinin temel avantajı, anatominin tamamen bozulmadan kalmasıdır.Ayrıca, aynı hayvan üzerinde zaman içinde tekrarlanan ölçümler yapılabilir. MRI, iskelet kasının anatomisinin yaralanma öncesi ve sonrasında non-invaziv olarak izlenmesine olanak tanır. Başlamak için, anestezi uygulanmı

an-vivo-rodent-model-contraction-induced-injury-non-invasive

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Akson ve miyelin yaralanmalarının dinamiklerini gerçek zamanlı olarak aynı anda görselleştirmek için iki foton uyarımlı hızlandırılmış mikroskopi kullanan bir protokol sunuyoruz. Önerilen bu protokol, yaralanma sonrası merkezi miyelinli akson kaderini etkileyebilecek ve kalıcı klinik sakatlığa katkıda bulunabilecek hem içsel hem de dışsal faktörlerin çalışmasına izin vermektedir.

Bir Ex vivo Lazer kaynaklı Omurilik Felçlileri Modeli Gerçek zamanlı aksonal Dejenerasyon mekanizmaları değerlendirmek için

Peroneal sinirin uyarılmasını ve sıçan arka ayağının anterior krural kompartmanının kasılmasını takiben ayağın dorsifleksiyonunu ölçmek için bir in vivo protokol tarif ediyoruz. Bu tür ölçümler, iskelet kası patolojisini ve kas onarımı ve rejenerasyonuna yönelik doku mühendisliği yaklaşımlarını değerlendirmek için vazgeçilmez bir translasyonel araçtır.

Uygulamaları<em&gt; İn Vivo</em&gt; Doku değerlendirilmesi için Rat Tibialis Anterior Fonksiyonel Test İskelet Kası Onarım Engineered

Sinir iletim ölçümü ateş fare modelleri değerlendirmek için yararlı bir araçtır ama sık sık öyle yalnızca hindlimbs siyatik sinir uyarmak için geçerlidir. Burada, bileşik kas aksiyon potansiyeli (CMAP) vivo brakiyal pleksus tarafından innervated fare forelimb kaslarda ölçmek için bir teknik açıklayın.

Vivo Bileşik kas aksiyon potansiyeli Motor nöron hastalığı, fare modellerinde ön ayakları üzerinden elektrofizyolojik ölçümü

Bu çalışmada tiroid ameliyatı bir domuz modelinde intraoperatif sinir izleme standart bir protokol geliştirmeyi amaçlamaktadır. Burada, genel anestezi, farklı elektrot karşılaştırmak ve normal ve yaralı tekrarlayan gırtlak sinirlerin elektrofizyolojik özellikleri incelemek için göstermek için bir iletişim kuralı mevcut.

Tiroid ameliyatı bir domuz modelinde intraoperatif sinir izleme

Burada uyarılmış ve spontan elektromiyografik potansiyellerin in vivo kronolojik kayıt için implante edilebilir bir sistemin üretimi için bir protokol sunulmaktadır. Sistem sinir yaralanması sonrasında laringeal kasların reinnervasyon araştırılması için uygulanır.

Vivo Elektromiyografide Kronik İçin İmplante Edilebilir Bir Sistem

Bu protokol, anestezi uygulanan domuzlarda ortak peroneal sinirin elektriksel stimülasyonu yoluyla elde edilen in vivo tork verilerinin değerlendirilmesi ve yorumlanması ile ilgili kısa deneysel ayrıntıları açıklamaktadır.

İn Vivo Domuzdan Hindlimb Dorsiflexor İzometrik Tork Ölçümü

Bu makalede, kemirgen gastroknemius kası üzerinde in vivo (yüzey ve iğne elektrot dizileri kullanılarak) ve ex vivo (dielektrik hücre kullanılarak) elektriksel empedans miyografisinin nasıl yapılacağı açıklanmaktadır. Hem farelerde hem de sıçanlarda tekniği gösterecek ve mevcut modifikasyonları detaylandıracak (yani, obez hayvanlar, yavrular).

Kemirgenlerde In Vivo ve Ex Vivo Elektriksel Empedans Miyografisi Gerçekleştirme

Solunum komplikasyonları, servikal omurilik yaralanması (cSCI) olan bireylerde önde gelen ölüm nedenidir. cSCI'nin hayvan modelleri, mekanik değerlendirmeler ve klinik öncesi çalışmalar için gereklidir. Burada, sıçanlarda tek taraflı C2 spinal hemiseksiyon (C2SH) sonrası diyafram kası (DIAm) aktivitesinin fonksiyonel iyileşmesini değerlendirmek için tekrarlanabilir bir yöntem sunuyoruz.

Sıçanlarda Tek Taraflı Servikal Omurilik Hemiseksiyonu Sonrası Eupneik Diyafram Aktivitesinin Fonksiyonel İyileşmesinin Değerlendirilmesi

Hacimsel kas kaybı (VML) yaralanmaları endojen rejeneratif yeteneği aşarak kalıcı fonksiyonel eksikliklere neden olur. Mevcut VML araştırması öncelikle uzuv ve gövde kaslarına odaklanmaktadır. VML'nin mekanik çalışmalarını kraniyofasiyal kaslara genişletmek için, bu makale, VML hasarı öncesi ve sonrası masseter kas fonksiyonunun uzunlamasına değerlendirilmesi için in vivo bir yöntemi açıklamaktadır.

Hacimsel Kas Kaybı (VML) Yaralanmasının Cerrahi Olarak Oluşturulmasını Takiben Sıçan Masseter Kasının İn vivo Fonksiyonel Değerlendirmesi

Hareket çalışmalarında elektromiyografi (EMG) analizi için hayvana monte edilebilir, minyatür bir ölçüm cihazı ile birlikte kas içi elektrotların kurulumu ve hazırlanması için bir protokol sunulmaktadır. Bu sistem, inme modeli sıçanlarda hareket iyileşmesini araştırmak için gerçek zamanlı EMG verilerinin kablosuz olarak iletilmesini sağlar.

Küçük hayvanlar için gerçek zamanlı giyilebilir elektromiyografi ölçüm sistemi

Bu makale, sıçanların inen aortasına in vivo telemetrik implantın yerleştirilmesi için adım adım bir protokol sunmaktadır; bu protokol, ağır yüksek toraksal omurilik yaralanmasından önce ve sonra kardiyovasküler parametrelerin, çekirdek vücut sıcaklığının ve hayvan aktivitesinin sürekli ve uzun vadeli izlenmesini sağlar.

In Vivo'da Omurilik yaralanması fare modellerinde uzun vadeli kardiyovasküler parametreleri, sıcaklığı ve aktiviteyi kaydetmek için telemetri

Öğrenin, sıçan dorsi fleksör kaslarında kasılma kaynaklı yaralanma oluşturma ve tork ölçümleri ile manyetik rezonans görüntüleme kullanarak fonksiyonel ve yapısal değişiklikleri izleme yöntemini.

Bir In vivo Kemirgen Model

Daha fazla video keşfet