Fare Embriyonik İdrar Yolunda Metilen Mavisi Boya Enjeksiyonu: İdrar Yollarındaki Konjenital Tıkanıklığı Değerlendirmek İçin Bir Yöntem

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biyoloji

0 görüntüleme • 3:47 dk • July 8th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İdrar yolu tıkanıklığını değerlendirmek için, sırtüstü pozisyonda bir perinatal fare embriyosunu hareketsiz hale getirerek başlayın. Şimdi, bir çift böbrek, üreter ve üretra ile ortak bir mesaneden oluşan tam gelişmiş bir idrar yolunu bulmak için embriyonun karın boşluğunu inceleyin.

Ardından, bir mikroiğne ile donatılmış boruya bağlı boş bir şırınga alın. Düzeneği metilen mavisi çözeltisi ile doldurun - koyu mavi bir izleme boyası. Mikroiğneyi renal pelvisin lümenine yerleştirin - böbrekteki üreterin huni benzeri genişlemiş proksimal bir ucu - ve boya çözeltisini enjekte edin.

Hidrostatik basınç nedeniyle, boya böbreklerin renal pelvisinden üreterden akar ve son olarak mesanenin lümeninde birikir. İdrar yolunun ilgili tarafından boya akışını kontrol etmek için boya enjeksiyon prosedürünü karşı böbrek ile tekrarlayın.

Son olarak, idrar yolunu görüntülemek için kameralı bir stereomikroskop kullanın. Görüntüleme sırasında, tıkanmamış bir idrar yolu derin lekeli bir mesane gösterirken, tıkanıklığı olan anormal idrar yolu boyanın serbest akışını kısıtlar. Tıkanıklık derecesine bağlı olarak, mesane lümeninde tam veya kısmi bir boya yokluğu gözlenir.

Forseps kullanarak, embriyonun karın boşluğunu açmak için cildi dikkatlice yırtın. Daha sonra karaciğer, mide ve bağırsaklar gibi fazla organ ve dokuları forseps ile keserek veya dorsalde bulunan böbrekleri, üreterleri ve mesaneyi açığa çıkarmak için çekerek dikkatlice çıkarın. Steril gazlı bez pedleri ile diseke edilen embriyodan fazla kanı emdirin, ardından boya enjeksiyonuna devam edin.

metilen mavisi çözeltisini iğne ucundan hidrostatik basınçla dışarı atarak iğne ve borudaki kabarcıkları çıkarın. Akışı başlatmak için boya solüsyonunu içeren şırıngayı iğne ucu seviyesinin üzerine kaldırın ve ardından akışı durdurmak için şırıngayı indirin. Daha sonra, iğneyi proksimal üreterin yakınındaki renal pelvise sokun ve yerleştirildikten sonra rahatsız etmemeye dikkat edin. İdrar yolu tıkanıklığını belirlemek için böbreğe boya enjeksiyonu yapın.

Renal pelvise bir iğnenin uygun şekilde sokulması bu testin başarısını belirler. Renal pelvise üretere doğru, ne böbrekten ne de kan damarına doğru bir iğne sokulmalıdır.

Hidrostatik basınç sağlamak için şırıngayı yaklaşık 20 santimetre yukarı kaldırın ve 15 ila 16 mikrolitre boya çözeltisinin akmasına izin verin. Ardından, önce renal pelvisten başlayarak, daha sonra üreterin uzunluğunda ve son olarak mesane lümeninde boyanın mavi rengini izleyin. Boya akışını durdurmak için şırıngayı yere yerleştirin ve iğneyi böbrekten çıkarın. Bir laboratuvar not defterinde böbreğin hidronefrozu, hidroüreter ve boya çözeltisinin son pozisyonunun bir kaydını yapın.

Son olarak, kontralateral böbreğin enjeksiyonunu yapın ve boyanın toplam 20 saniye boyunca akmasına izin verin. Stereomikroskoba bağlı kamera ve görüntüleme programını kullanarak boya solüsyonu ile izlenen böbrek, üreter ve mesanenin görüntülerini alın.

08:28

Zebra balığı Beyin Ventrikül Enjeksiyon

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:58

Zebra balığı Nephrotoxin Mikroenjeksiyon Akut Böbrek Yaralanması Model

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:51

Meme kanseri Sentinel düğüm biyopsi tek bir tekniği olarak 1% metilen mavi boya uygulaması

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:24

Transüretral İndüksiyon Fare İdrar Yolu Enfeksiyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:24

Yüksek Verimli In situ Hibridizasyon Yöntemi

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:14

Biyolüminesans kullanarak fare modelinde idrar yolu enfeksiyonunun görselleştirilmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

05:23

Bakteriyel Enfeksiyonun Görselleştirilmesi İçin Fare Mesanesi Dokusu Hazırlanması

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:06

Enfekte Bir Fare Mesanesindeki Hücre İçi Bakteri Topluluklarının Görselleştirilmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:52

Prenatal Fare Embriyolarının Alınması: Hamile Fareden Embriyo Toplama Prosedürü

İlgili videolar

0 Görüntüler

06:05

İdrar yolu Junction obstrüksiyonu kusurları Metilen mavisi boya enjeksiyonla değerlendirilmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 15 Ağustos 2026