Halka Şeklinde Mikro Modelleme Hücre Kiralite Deneyi: Halka Şeklindeki Mikro Desenlerde Hücre Hizalamasına Dayalı Çok Hücreli Kiraliteyi Belirlemek İçin İn Vitro Bir Teknik

İn vitro memeli hücre kiralitesini belirlemek için - hücrelerin sınırlayıcı koşullar altında sola veya sağa doğru hizalanması için sol-sağ önyargısı - ortam içeren çok kuyulu bir plakada özel olarak üretilmiş altın kaplı slaytlarla başlayın. Slaytlar, hücre yapışmasına dirençli kendinden montajlı tek tabaka ile doldurulmuş, hücre adezyonunu teşvik eden fibronektinin halka şeklindeki adalarının mikro modellerini içerir.

Daha sonra, slaytların üzerine uygun miktarda memeli hücre süspansiyonu tohumlayın ve inkübe edin. Hücreler, fibronektin içeren halka mikro modellerine adsorbe olur. Çevreleyen kendinden montajlı tek katman, halka sınırlarının dışında spesifik olmayan hücre bağlanmasını önler.

Medyayı, iliştirilmemiş hücreleri kaldırarak yeni medyayla değiştirin. Bir set slayta aktin enterferans yapan bir ilaç ekleyin ve inkübe edin.

Yapışan hücreler çoğalır, yayılır ve alttaki fibronektin adalarının şeklini alırken, hücre tek tabakasını sınırlayan uzamsal ipuçlarına yanıt olarak aktin liflerini yeniden düzenler ve önyargılı hizalamayı teşvik eder.

Şimdi, hücre fiksasyonu için slaytları paraformaldehit ile tedavi edin. Faz kontrast mikroskobu altında, halka mikro desenleri üzerindeki