JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 4:25 dk. • July 8th, 2025
Metabolik olarak aktif hücrelerde, karbon içeren substratlar, enerji üretmek ve bir yan ürün olarak karbondioksiti serbest bırakmak için bir dizi biyokimyasal reaksiyon yoluyla oksitlenir.
Substrat oksidasyon oranını belirlemek için, istenen farklılaşmamış hücrelerin yapışık bir kültürü ile başlayın. Hücreleri, omurgasında on dört radyoaktif karbon içeren uygun bir substrat ile bir ortamda destekleyin ve inkübe edin.
Hücreler substratı tüketir ve hücrelerden çevredeki ortama yayılan radyoaktif işaretli karbondioksiti serbest bırakmak için oksitler.
Reaksiyonu söndürmek için bu ortamı perklorik asit içeren bir gaz tutucu tertibatına aktarın. Bu tüp, tüp kapağının içine yerleştirilmiş sodyum hidroksite batırılmış bir filtre kağıdı içerir. Kapağı kapatın ve inkübe edin.
Kuluçka sırasında, gaz halindeki karbondioksit tüpün içine salınır. Sodyum hidroksit, radyoaktif işaretli karbon dioksiti emerek filtre kağıdına hapseder. Bu filtre kağıdını bir sintilasyon kokteyli içeren bir şişeye aktarın ve sıvı sintilasyon sayacının içine yerleştirin.
Tezgahın içinde, radyoaktif işaretli karbon, yüksek enerjili beta parçacıkları yayarak radyoaktif bozunmaya uğrar. Bu parçacıklar, sintilasyon kokte
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin