JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 4:10 dk. • July 8th, 2025
Septinler, çeşitli hücresel işlevler için iç plazma zarında filamentlere ve daha yüksek dereceli yapılara kendi kendine bir araya gelme yeteneğine sahip, terminal amino ve karboksil alanlarla çevrili bir GTP bağlama alanı içeren hücre iskeleti proteinleridir.
Biyolojik bir membran taklidi kullanarak in vitro olarak septin-membran etkileşimlerini incelemek için kesilmiş bir mikrosantrifüj tüpü edinin. Kesilmemiş, düz kenarın üzerine ultraviyole yapıştırıcı uygulayın ve plazma ile işlenmiş, hidrofilize cam lamel üzerine yerleştirin. Ultraviyole ışığa maruz kaldığında, yapıştırıcı sertleşir ve açık bir reaksiyon odası oluşturur.
İstenilen lipid bileşimine sahip, mono ve iki değerlikli katyon içeren tampon ile desteklenmiş monodispers zwitteriyonik unilameller lipid veziküllerini hazneye aktarın. Katyonlar, lipid veziküllerinin lamel üzerine adsorbe olmasını ve birikmesini kolaylaştırır. Odayı hafifçe sallayın, vezikül yırtılmasını başlatın ve inkübe edin.
Yırtılmış veziküller açılır ve hidrofilik kafa grupları aracılığıyla lamel ile kaynaşır ve düzlemsel lipid çift katmanlı yamalar oluşturur. Yamaların kenarları, kalan veziküllerin yırtılmasını tetikleyerek sürekli düzlemsel destekli
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin