JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 4:38 dk. • July 8th, 2025
Dış zarda bulunan gram negatif bir bakteri toksini olan endotoksin, lipid A ve O-antijen dahil olmak üzere esas olarak lipitler ve polisakkaritlerden oluşan bir lipopolisakkarit, LPS'dir. Enfeksiyon sırasında serbest bırakıldığında, bağışıklık sistemi tarafından tanınır ve sitokin bazlı inflamatuar yanıtları tetikler.
Limulus amoebosit lizatı, LAL kullanılarak bir lipozomal ilaç nano formülasyonunda endotoksin kontaminasyonunu tahmin etmek için, tahlil, biri ilacı içeren ve diğeri ilacı içeren reaksiyon tüpleri hazırlayın, bilinen bir endotoksin konsantrasyonu ile çivilenmiş olarak.
At nalı yengeci, Limulus polyphemus, kan hücreleri veya amimositlerden elde edilen protein lizat içeren LAL reaktifi ekleyin. Lizat, aktif olmayan serin proteazları - faktör B, faktör C, pıhtılaşma enzimi - ve bir jel pıhtılaşma proteini, pıhtılaştırıcı içerir.
Tüpleri vorteksleyin ve çözeltilerin bulanıklığını ölçmek için bir bulanıklık ölçere yükleyin.
Lipozomal ilaçlara bağlı kontamine LPS'nin varlığında, LPS'ye duyarlı faktör C otokatalitik olarak aktive edilir, bu daha sonra pıhtılaşma enzimini pıhtılaşma enzimine dönüştüren faktör B'yi parçalar ve aktive eder. Bu aktive edilmiş enzim, koagülojen p
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin