JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 3:49 dk. • July 8th, 2025
Karbonhidrat parçalayıcı enzimler, karmaşık polisakkaritleri daha küçük oligosakkaritlere ayırır.
Enzim bozunma aktivitesini taramak için, polisakkaritlerin farklı renkli klorotriazin boyaları ile boyanmasıyla hazırlanan çoklu kromojenik polimer hidrojeller, CPH alarak başlayın. Her polisakkarit daha sonra enzimatik bozunma için sentetik bir substrat olan hidrojel oluşturmak üzere kimyasal olarak çapraz bağlanır.
Şimdi, farklı CPH substratlarını gözenekli bir reaksiyon plakasının farklı kuyucuklarına dağıtın. Bir aktivasyon çözeltisi ekleyin ve substratların optimum aktivasyonunu sağlamak için inkübe edin.
Tahlil plakasını boş bir ürün plakasının üzerine yerleştirin. Aktivasyon çözeltisinin reaksiyon plakasının gözeneklerinden verimli bir şekilde çıkarılmasını kolaylaştırmak için plakaları düşük bir hızda birlikte santrifüjleyin.
Daha sonra, reaksiyon plakasının tüm kuyucuklarını, enzimatik aktivite için optimal bir pH'ı koruyan uygun bir tamponda aynı tip karbonhidrat parçalayıcı enzim ile destekleyin. Plakayı kapatın ve enzimlerin polimerik ağa düzgün bir şekilde dağılmasına izin vermek için hafif çalkalama ile inkübe edin ve substrata erişmelerine izin verin.
İnkübasyon sırasınd
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin