JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 4:31 dk. • July 8th, 2025
Mitokanlar, kanser hücrelerinde mitokondrinin işleyişini seçici olarak etkileyen ve apoptozu indükleyen bir ilaç sınıfıdır.
Mitokan sitotoksisitesini belirlemek için, yarı yapışık kanser hücreleri içeren bir hücre süspansiyonunu çok kuyucuklu bir plaka üzerine tohumlayın. Plakaya istenen mitocan çözeltisi uygulayın ve inkübe edin.
Mitocan, mitokondriyal aktivitesini bozmak için kanser hücresine girer ve sonunda mitokana duyarlı kanser hücrelerinde hücre ölümüne yol açar. Hücrelere, Hoechst boyası ve propidyum iyodür karışımı içeren bir boyama çözeltisi uygulayın.
Zar geçirgen bir floresan boya olan Hoechst, tüm hücrelere nüfuz eder ve DNA'larının AT açısından zengin bölgesine bağlanarak hem canlı hem de ölü hücrelerin çekirdeklerine mavi bir floresan verir.
Buna karşılık, zar geçirimsiz bir floresan boya olan propidyum iyodür, ölü hücrelere yalnızca zarlarının hasarlı kısımlarından girer. Boya, DNA bazları arasında interkalasyon yaparak ölü hücrelere ek bir kırmızı floresan verir. Bu hücrelerin çekirdeğinde her iki boyanın da bulunması, ölü hücrelerin mor görünmesine neden olur.
Görüntüleme sırasında daha fazla doğruluk için hücreleri yerleştirmek için plakayı düşük bir hızda santr
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin