Hücre Dışı Floresan Glikoz Analog Tükenmesinin Ölçümü: Ex vivo Fare Organlarında Glikoz Alımını Değerlendirmek İçin Vekil Bir Ölçüm Tekniği
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 3:04 dk. • July 8th, 2025
Dokularda, hücre dışı glikoz, spesifik glikoz taşıyıcıları yoluyla kolaylaştırılmış difüzyon yoluyla hücrelere girer.
Glikoz, hücresel metabolik süreçler için adenozin trifosfat veya ATP formunda enerji üreten metabolik bir yol olan glikoliz yoluyla hücre sitoplazmasında piruvata parçalanır.
Glikoz alımını ex vivo ölçmek için, taze hasat edilmiş küçük boyutlu fare karaciğer dokusu ile başlayın. Fizyolojik koşulları korumak için uygun tampon ekleyin.
Daha sonra, dokuyu glikoz içermeyen ortam içeren çok kuyulu bir plakaya aktarın. Bunu, floresan etiketli bir glikoz analoğu olan deoksiglukoz ile desteklenmiş glikoz içermeyen ortamda inkübasyon ile takip edin. Dokunun küçük boyutu deoksiglukozun girmesine izin verir.
Deoksiglukoz, glikoz yokluğunda hücrelere glikoz taşıyıcıları yoluyla girer. Hücreler içinde, deoksiglukoz fosforilasyona uğrar, ancak daha fazla metabolize edilmez ve bu da birikmesine yol açar.
Kullanılmayan floresan etiketli deoksiglukoz içeren ortamları istenen zaman noktalarında toplayın. Bir mikroplaka okuyucu kullanarak, deoksiglukozun hücre içi doku alımı ile ilişkilendirilebilen hücre dışı deoksiglukozun floresansını ölçün.
Hasat edilen dokuları veya organları bir
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin