JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 3:24 dk. • July 8th, 2025
Birincil hücre enerji kaynağı olan adenozin trifosfat, ATP, çeşitli hücresel fonksiyonlar için hayati önem taşır. Stres altında, hücre içi ATP seviyeleri olumsuz etkilenir ve bu da ATP'yi metabolik olarak aktif, canlı hücreler için iyi bir belirteç haline getirir.
Başlamak için, ışık yoğunluğu ölçümü sırasında minimum ışık saçılımı için tohum tümör hücresi süspansiyonunu siyah duvarlı, şeffaf tabanlı bir mikroplakaya yerleştirin. Mikroplaka, hücrelerin plakaya yapışmasını önleyen, hücreden hücreye etkileşimi ve tümör organoidlerine - tümör mikro çevresini taklit eden üç boyutlu doku kültürleri - kendi kendine montajı sağlayan bir hidrojel kaplamadan oluşur.
Ardından, bir test bileşiği ile tedavi edin. Test bileşiği organoid hücrelerle etkileşime girer ve büyüme inhibitör potansiyeline bağlı olarak, enerji üreten metabolik süreçleri bozarak hücre içi ATP tükenmesine neden olabilir.
İşlem sonrası, deterjanlar, ATPaz inhibitörleri, lusiferaz enzimi, lusiferaza özgü substrat, lusiferin ve magnezyum iyonlarını içeren tek aşamalı bir reaktif ekleyin. İstenilen süre boyunca kuluçkaya yatırın.
Deterjan, hücre zarlarını çözündürerek hücre lizizine ve ATP'nin çözelti içine ekstraksiyonuna ne
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin