Bioreporter Testi: SARS-CoV-2 Antikorlarını Tespit Etmek için Biyolüminesan Raportör Sistemi Kullanan Hassas Bir Teknik

Şiddetli akut solunum sendromu koronavirüs 2 veya SARS-CoV-2 enfeksiyonu sırasında, virüs spike proteininin reseptör bağlanma alanı (RBD), konak hücre anjiyotensin dönüştürücü enzim 2, ACE2'ye bağlanarak viral hücre girişini kolaylaştırır. Buna karşılık, bağışıklık sistemi viral RBD'ye bağlanan ve hücresel girişi önleyen antikorlar üreterek viral enfektiviteyi azaltır.

RBD hedefli SARS-CoV-2 antikorlarını tespit etmek için, SARS-CoV-2 spike RBD'ye kaynaşmış küçük boyutlu protein parçalarından oluşan rekombinant bir biyomuhabir süspansiyonu alın. Standart RBD hedefli SARS-CoV-2 antikorları ve antikor bağlayıcı manyetik boncuklar ekleyin.

İnkübasyon sırasında, Fc antikor bölgesi, boncukların Fc bağlama alanlarına bağlanır. Ek olarak, rekombinant biyomuhabir, boncuk bağlı RBD hedefli SARS-CoV-2 antikorlarına bağlanır.

Kuluçka sonrası karışımı santrifüjleyin. Bağlanmamış biyomuhabir içeren süpernatanı çıkarın. Bağlı boncukları arabellekte yeniden askıya alın. Çok kuyulu bir plakaya aktarın.

Küçük boyutlu protein parçaları için yüksek afiniteye sahip, büyük boyutlu protein parçaları içeren bir çözelti ekleyin. Büyük ve küçük boyutlu protein parçaları birbirine bağlanarak aktif bir mühen