JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 3:03 dk. • July 8th, 2025
Hücresel protein homeostazı veya proteostaz, yanlış katlanmış proteinlerin bozulması ile birlikte protein katlanmasının ve fonksiyonunun düzenlenmesini içerir. Yaşlanma sırasında, proteostaz mekanizması azalır, yanlış katlanmış proteinlerin birikmesine ve daha fazla toplanmasına neden olarak hücresel işlev bozukluğuna neden olur.
Yaşa bağlı proteostaz düşüşünü belirlemek için, gelişimsel olarak senkronize, yetişkin transgenik Caenorhabditis elegans ile başlayın.
Bu solucanların kas hücreleri, bir floresan etiketi ile kaynaşmış anormal şekilde genişlemiş poliglutamin veya poliQ tekrarları ile proteinleri eksprese eder. PolyQ proteinleri yanlış katlanmaya eğilimlidir ve bu nedenle birikme üzerine agregalar oluşturabilir.
Solucanları bir agaroz pedi içeren bir mikroskop lamına aktarın ve canlı hücre görüntüleme için uygun kimyasalla hareketsiz hale getirin. Bir floresan mikroskobu kullanarak, floresan polyQ agregalarına karşılık gelen parlak, floresan odak sinyallerini belirlemek için solucanların vücut duvarı kaslarını belirli bir süre boyunca görselleştirin.
Yaşa bağlı proteostazın azalmasına bağlı olarak günler içinde ilerleyici poliQ agregat birikimi meydana gelir ve bu da daha fa
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin