Antiparaziter Kimyasalların Parazitlere Karşı Etkinliğini İncelemek İçin Lusiferaz Testi

Bir protozoan parazit olan Toxoplasma gondii, yalnızca çekirdekli, hayvan konakçı hücreler içinde çoğalır. Endositik süreç boyunca konakçı hücreleri istila ederek parazitohoröz bir vakuol oluşturur. Vakuolün içinde, parazit konakçı sitozolik proteinleri yutar ve büyüme için besinler alır.

Antiparaziter kimyasalların konakçı hücrelerin içindeki parazitler üzerindeki etkinliğini taramak için, birden fazla oyukta insan sünnet derisi fibroblastlarının yapışık bir kültürünü içeren bir test plakası alın.

Her bir oyuğa lüsiferaz (lüminesans üreten bir enzim) eksprese eden eşit miktarda Toxoplasma paraziti dağıtın. Kuluçkaya yatırın, parazitlerin konakçı hücreleri istila etmesine ve parazitoforöz vakuol içinde büyümesine izin verin.

Kuluçka sonrası, yutulmayan parazitleri uzaklaştırarak ortamı aspire edin. Kuyucukları farklı konsantrasyonlarda sistein proteaz hedefli antiparaziter bileşik ile destekleyin ve inkübe edin.

İlaç molekülleri parazitlere ulaşmak için konak hücreye girer. İçeri girdikten sonra, ilaç parazitin sistein proteaz enzimini inhibe eder, konakçıya bağlı parazitin besin alımını bozar ve büyümesini durdurur.

İlaç içeren ortamı aspire edin. Lusiferaz enzimine özgü bir subst