Solucanlardaki Bir Bileşiğin Nöroprotektif Etkisini Belirlemek için PolyQ Agregasyon Testi

Bazı nörodejeneratif bozukluklarda, hastalıkla ilişkili protein, genişlemiş bir poliglutamin, poliQ, trakt - ardışık glutamin kalıntıları dizisi - içerir ve anormal bir şekilde uyumludur. Bozulmuş konformasyon, protein homeostazını dengesizleştirir, protein birikimine ve toksik agregatların oluşumuna neden olarak nöronal disfonksiyona ve ölüme yol açar.

Bir test bileşiğinin poliQ agregasyonu ile ilişkili proteotoksisiteyi hafifletmedeki koruyucu kapasitesini taramak için, vücut duvarı kas hücrelerinde floresan etiketli poliQ proteinlerini eksprese eden transgenik Caenorhabditis elegans larvalarının bir süspansiyonunu elde edin.

Bakteriyel gıda ile takviye edilmiş ortam içeren çok kuyulu bir plaka alın. Test bileşiğini bir dizi oyuk içine ekleyin. Larvaları çok kuyulu plakaya aktarın. Ortamın dehidrasyonunu ve mikrobiyal kontaminasyonu önlemek için plakayı kapatın. Kuluçkaya yatırın, larvaların yetişkinlere dönüşmesine izin verin.

Gelişim sırasında, nematod yaşlandıkça, poliQ proteinleri kas hücreleri içinde aşamalı olarak birikir ve agregalar oluşturur.

Test bileşiği ortamda mevcutsa, kas hücrelerine girer ve koruyucu kapasitesine bağlı olarak, poliQ agregasyonunu baskılayarak ve g