Murin Miyoblastlarının Ko-Kültürdeki Göç Kapasitesini Değerlendirmek için Yara Testi

Bir yaraya yanıt olarak, salgı hücreleri, farklılaşmamış kas hücreleri olan miyoblastları aktive etmek için parakrin sinyal molekülleri üretir. Aktive edilmiş miyoblastlar, çoğaldıkları yara bölgesine doğru göç ederek yaranın iyileşmesine neden olur.

Miyoblastların göç kapasitesini in vitro olarak değerlendirmek için, birleşik bir tek tabaka murin miyoblastları içeren çok kuyulu bir plaka alın. Bir pipet ucu kullanarak, kuyu içinde yara bölgesini simüle eden doğrusal, hücresiz bir yama oluşturmak için tek tabakayı çizin.

Yara yamasını rahatsız etmeden kuyuyu büyüme ortamı ile dikkatlice destekleyin.

Uygun bir ortamda yapışık bir nöral krest hücresi kültürü veya NCC'ler - salgı hücreleri - içeren membranöz bir ek alın. Ek parçayı kuyunun içine yerleştirin, böylece tabandaki NCC'ler yara yamasına yakın olur. Ko-kültürü istenen süre boyunca inkübe edin.

İnkübasyon sırasında, NCC'ler, miyoblastlar üzerindeki spesifik reseptörlere bağlanan ve bir sinyal kaskadı başlatan sinyal moleküllerini serbest bırakır. Bu sinyalleme, miyoblastlarda aktinin yeniden düzenlenmesini kolaylaştırır ve sonuç olarak, bu hücreler kenarlarında lamellipodia ve filopodia gibi sitoplazmik çıkıntılar geliştirir.