Kimyasal Olarak Bağlanmış Antikor-Antijen Konjugatlarını Doğrulamak için Enzime Bağlı İmmünosorbent Testi

0 views • 2:57 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bir bağışıklık tepkisi ortaya çıkarmak için, antijenler, dendritik hücrelerin yüzeyinde bulunan endositik reseptörlere veya antijenlerin alımına yardımcı olan DC'lere (antijen sunan hücreler) özgü antikorlara bağlanır.

Bir antikor-antijen kompleksinin oluşumu çok önemli bir adımdır ve antijenin DC hedefli bir monoklonal antikora kimyasal olarak bağlanmasıyla in vitro olarak gerçekleştirilebilir.

Konjugasyon işleminin verimliliğini doğrulamak için, yakalanan antikorlarla önceden kaplanmış bir ELISA plakası ile başlayın. Antijenlerin kaplanmış yüzeye spesifik olmayan bağlanmasını önlemek için plakayı bir bloke edici çözelti ile muamele edin.

Plakaya kimyasal olarak çapraz bağlanmış, antikor-antijen konjugatları ekleyin ve inkübe edin. Antijenin spesifik epitopu, yakalanan antikorun paratopu ile etkileşime girerek bir antikor-antijen-antikor kompleksi oluşturur.

Daha sonra, plakayı bir enzime bağlı üçüncü bir antikor seti ile kaplayın. Bu antikorlar, konjugatta bulunan birincil antikorlara spesifik olarak bağlanarak tespit edilmesini sağlar.

Konjugatları görselleştirmek için kromojenik substratı içeren bir tampon ekleyin. Antikora bağlı enzim, substrat ile reaksiyona girerek renkli ürünü oluşturur.

Plakaya, enzimi inaktive eden ve reaksiyonu sonlandıran asitleştirilmiş bir inaktivasyon çözeltisi uygulayın. Plakayı spektrofotometrik olarak analiz edin. Renkli bir çözeltinin varlığı, antikor-antijen konjugatlarının varlığını doğrular ve başarılı konjugasyonu doğrular.

ELISA ile konjugasyonun başarısını doğrulamak için, uygun bir 96 oyuklu ELISA plakasını oyuk başına 100 mikrolitre anti-OVA antikoru ile kaplayın ve mililitre başına 6 mikrogramdan mililitre başına 93.8 nanograma kadar seyreltmeler elde etmek için anti-DEC-205 / OVA'yı bloke edici tamponda 1: 2 oranında seri olarak seyreltin.

Oda sıcaklığında bir saatlik bir inkübasyon için antikor kaplı plakanın uygun kuyucuklarına her seyreltmeden 100 mikrolitre ekleyin. Kuluçka süresinin sonunda, oda sıcaklığında bir saatlik bir inkübasyon için plakaya anti-DEC-205 / OVA konjugatına karşı 100 mikrolitre yaban turpu peroksidaz konjuge antikoru ekleyin.

Daha sonra, spektrofotometri ile renk reaksiyonunun analizine izin vermek için her oyuğa 50 mikrolitre yaban turpu peroksidaz substratı ekleyin.

12:28

Antikor parçalarının bir kütüphanenin taranması için bakteriyel iç zar görüntü

Related Videos

0 Views

06:15

Timus bağlı ve timus bağımsız immünglobulin izotip yanıt Immunosorbent Assay enzim bağlı kullanarak farelerde karakterizasyonu

Related Videos

0 Views

14:48

Bir Multiplex Antikor Tarama Yöntemi kullanılarak bir Luminex xMAP Tahlil için bir Capture ELISA Dönüşüm

Related Videos

0 Views

04:45

Multianalit İmmünoboncuk Testi: İnsan Serum Numunesinde Çoklu Antikor Alt Tiplerinin Eşzamanlı Tespiti için Akış Tabanlı Bir İmmünoassay Tekniği

Related Videos

0 Views

09:08

Bir Tükürük Antikor Multiplex Immuoassay Gelişmekte Çevre Patojenler İnsan Pozlama'yı Tedbir

Related Videos

0 Views

11:02

Genetik bir kanonik olmayan Amino asit antikor-uyuşturucu üretimi için kodlama Conjugates bir hızlı Bioorthogonal tepki

Related Videos

0 Views

10:35

Vitro ve In Vivo'da Fare Dendritik Hücrelerini Hedeflemek için Tam Uzunlukta Proteinli Saflaştırılmış DEC-205 Yönlendirilmiş Antikorun Kimyasal Konjugasyonu

Related Videos

0 Views

07:08

Çok Katlı Boncuk Tabanlı Akış Analiz Sistemi için Hızlı, Çok Katlı Çift Muhabir IgG ve IgM SARS-CoV-2 Nötralizasyon Tahlil

Related Videos

0 Views

10:10

Küçük Molekül Bileşiklerinin Hızlı ve Nicel Tespiti için Yanal Akış İmmünokromatografik Şeridinin Geliştirilmesi

Related Videos

0 Views

Last updated: 11 July 2026