JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 4:00 dk. • July 8th, 2025
Glikojen sentezinde çok önemli bir enzim olan glikojen sentaz, üridin difosfat glikozu veya UDP-glukozu - bir nükleotid şekeri - UDP ve glikosil kalıntısına ayırır ve salınan glikoz monomerini büyüyen glikojen zincirine ekler.
Glikojen sentaz aktivitesini tahmin etmek için, bir tüpte glikojen, UDP-glikoz, ATP, fosfoenolpiruvat ve nikotinamid adenin dinükleotid veya NADH içeren bir reaksiyon karışımı alarak başlayın. Nükleosit difosfat veya NDP, kinaz enzimi ve bir piruvat kinaz ve laktat dehidrojenaz enzim kokteyli ekleyin. İçeriği karıştırın ve inkübe edin.
Enzimatik reaksiyonu başlatmak için tüpe glikojen sentaz içeren numune ekleyin.
Glikojen sentaz, UDP-glikoz üzerinde etki ederek UDP ve bir glikosil kalıntısı oluşturur. Enzim, serbest glikoz monomerini alır ve onu reaksiyon karışımının glikojen zincirine dahil eder. ATP'nin varlığında, reaksiyon karışımının NDP kinazı, kullanılmayan UDP'yi fosforile eder, onu UTP'ye dönüştürür ve ADP üretir.
Piruvat kinaz enzimi, ADP'ye etki eder ve ATP ve piruvat üretmek için reaksiyon karışımının fosfoenolpiruvat tarafından bağışlanan bir fosfat ekler. Daha sonra, laktat dehidrojenaz, piruvatı laktata dönüştürür ve reaksiyon sırasında NADH'y
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin