Oküler mikrovasküler proliferasyonu ex vivo incelemek için koroid filizlenme testi

Memeli gözünde, sklera ve retina arasında yer alan koroid, perivasküler makrofajlar ve retinaya oksijen ve besin sağlayan perisitlerle kaplı bir kan kılcal damarları tabakası olan koryokapillaris içerir. Koryokapilis'ten filizlenen anormal kan damarı, çeşitli vasküler göz hastalıklarında ortaya çıkar.

Düzensiz choriocapillaris filizlenme ex vivo incelemek için, sklera ve retina pigment epiteline veya RPE'ye bağlı koroid içeren hasat edilmiş fare gözü eksplantlarını alın.

Çok kuyucuklu bir plakanın kuyucuklarına bazal membran özütü damlacıkları veya hücre dışı matris proteinleri açısından zenginleştirilmiş bir hidrojel olan BME ekleyin. Doku düzleşmesini önleyerek eksplantları damlacıklara yerleştirin. BME'nin katılaşmasına izin verin.

Endotel hücresi veya EC'ye özgü büyüme faktörleri ile desteklenmiş ortam ekleyin. Kuluçkaya yatmak. RPE, EC'ye özgü büyüme faktörlerinin yanı sıra kapiller EC proliferasyonunu uyaran vasküler endotelyal büyüme faktörü salgılar.

Katılaşmış BME, çoğalan EC'leri filizlenen kılcal benzeri tübüller oluşturmaya teşvik eden hücre dışı bir matris oluşturur. Perisitler göç eder ve bu filizlenen kılcal damarlara yapışır, bu da kılcal EC'lerin olgunlaşmasını kol