Test Bileşiklerinin Nöronlar Üzerindeki Nörotoksisitesini Değerlendirmek için Lüminesans Tabanlı Test
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 4:00 dk. • July 8th, 2025
Nörit büyümesi - nöronların projeksiyonlar geliştirdiği yer - nöral fonksiyon ve rejenerasyon için çok önemlidir.
Nörit büyümesini teşvik eden test bileşiklerinin nörotoksik etkilerini in vitro olarak değerlendirmek için, farklılaşma ortamında bir insan nöral progenitör hücresi, hNPC, süspansiyon elde edin.
Hücreleri, poli-L-lizin ve laminin ile kaplanmış çok kuyulu plaka kuyucuklarına tohumlayın, hücrenin kuyu dibine bağlanmasını kolaylaştırır ve hücresel büyümeyi destekler. Farklılaşma ortamı bileşenleri, nöronlara hNPC farklılaşmasını teşvik eder.
Bir kuyu setini nörit büyümesini teşvik eden test bileşiği ile muamele edin. Bu, hNPC'den türetilen nöronlarla etkileşime girer ve hücresel metabolik süreçleri ve ardından birincil hücresel enerji kaynağı olan adenozin trifosfat, ATP konsantrasyonunu bozmadan nörit büyümesine neden olabilir.
Magnezyum iyonları ile birlikte deterjanlar, lusiferaz enzimi ve lusiferaz substratı, lusiferin ve ATPaz inhibitörleri içeren tek aşamalı reaktifi ekleyin ve karıştırın.
Deterjanlar hücre zarını bozarak hücre parçalanmasına ve hücre içi ATP'nin çözeltiye salınmasına neden olur. ATPaz inhibitörleri, salınan endojen ATPazı inhibe eder ve bu da ATP öl
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin